[發明專利]高親和力抗體無效
| 申請號: | 99810367.5 | 申請日: | 1999-08-20 |
| 公開(公告)號: | CN1315966A | 公開(公告)日: | 2001-10-03 |
| 發明(設計)人: | P·J·哈里森 | 申請(專利權)人: | KS生物醫學有限公司 |
| 主分類號: | C07K16/00 | 分類號: | C07K16/00;C07K16/30;C12N15/13;C12N15/63 |
| 代理公司: | 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所 | 代理人: | 樊衛民 |
| 地址: | 英國*** | 國省代碼: | 暫無信息 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 親和力 抗體 | ||
1.一種高親和力單克隆抗體,其親和力的特征為:
(ⅰ)在抗原包被的微量滴定板的孔內溫育第一種和第二種抗體樣品,其濃度選擇在標準曲線的線性反應部分之中,pH7.2,37℃,1小時;
(ⅱ)從兩種樣品中去除未結合的抗體;
(ⅲ)將第一種樣品與PBS在pH7.2條件下37℃溫育1小時,并將第二種樣品的pH值降至pH3或更低后37℃溫育1小時;
(ⅳ)去除兩種樣品中未結合的抗體;
(ⅴ)將兩種樣品分別同抗抗體堿性磷酸酶偶聯物在37℃溫育1小時;
(ⅵ)去除兩種樣品中未結合的偶聯物;以及
(ⅶ)樣品中加入PNPP底物,測定樣品在405nm的光吸收值,以確定與抗原結合的抗體量,其中第二種樣品的結合量大于50%的第一種樣品的結合量。
2.根據權利要求1的抗體,其中第二種樣品的抗體結合量大于60%的第一種樣品的抗體結合量。
3.根據權利要求1或權利要求2的抗體,其中步驟(ⅲ)的pH值降至pH2.5-pH2.0。
4.根據前面任一權利要求的非嚙齒類的抗體。
5.根據前面任一權利要求的抗體,其中有針對腫瘤相關抗原的親和力。
6.根據權利要求5的抗體,其中抗原為癌胚抗原。
7.根據前面任一權利要求的抗體,其為單鏈Fv、F(ab′)2、Fv或Fab。
8.根據權利要求7的抗體,該抗體具有一個包含SEQ?ID?No.2中定義的氨基酸序列的重鏈可變區和一個包含SEQ?ID?No.4中定義的氨基酸序列的輕鏈可變區,或其變體。
9.一種編碼根據權利要求8的抗體的多聚核苷酸分子,其中多聚核苷酸包含SEQ?ID?No.1和3中定義的核苷酸序列,或其變體。
10.一種包含根據權利要求9的多聚核苷酸分子的克隆載體。
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