[發明專利]以綠熒光蛋白(GFP)為標記的腫瘤轉移模型

無效

• 申請號: 98804513.3
• 申請日: 1998-04-28
• 公開（公告）號: CN1264429A
• 公開（公告）日: 2000-08-23
• 發明（設計）人: 譚玉英;千島隆司
• 申請（專利權）人: 抗癌股份有限公司
• 主分類號: C12N15/86
• 分類號: C12N15/86;C12N5/10;A01K67/027;C07K14/435
• 代理公司: 上海專利商標事務所
• 代理人: 陳文青

1.一種跟蹤原發腫瘤轉移進展的方法，該方法包括可選性地對經修改而含有表達綠熒光蛋白(GFP)的腫瘤的脊椎動物進行開膛，并觀察組織中有否熒光。

2.根據權利要求1所述的方法，其中的動物被開膛。

3.根據權利要求2所述的方法，其中至少有些組織被切除。

4.根據權利要求3所述的方法，其中所述的被切除組織接受顯微鏡鏡檢。

5.根據權利要求1至4中任一項所述的方法，其中所述的脊椎動物經修飾后含有通過手術正位移植法植入的表達GFP的腫瘤。

6.根據權利要求1至4中任一項所述的方法，其中所述動物體內的內源性原發腫瘤經修飾后含有GFP的表達系統。

7.根據權利要求6所述的方法，其中所述的表達系統包含一個病毒啟動子；而且/或：

所述的脊椎動物是人；而且/或

所述的表達系統還含有編碼治療蛋白的核苷酸序列。

8.一種脊椎動物，經修飾后含有表達GFP的腫瘤。

9.根據權利要求8所述的脊椎動物，它是哺乳動物；而且/或

所述的動物是免疫力低下的；而且/或

所述的腫瘤是肺腫瘤或卵巢腫瘤；而且/或

所述的GFP是hGFP-ST65T；而且/或

其中，表達GFP的腫瘤是通過手術移植表達GFP的前體腫瘤到如下組織或器官部位而得到的，腫瘤所含的細胞即來自所述的前體腫瘤含有的細胞，或者，所述的表達GFP的腫瘤是通過將GFP表達系統提供給所述動物的內源腫瘤得到的。

10.一種經修飾而能產生GFP的腫瘤細胞，其中的腫瘤細胞被如下表達載體轉染，該載體包含在異源調控序列調控下的編碼所述GFP的核苷酸序列。

11.根據權利要求10所述的細胞，它是無限繁殖化細胞系。

12.根據權利要求11所述的細胞系，它是人乳房癌細胞系、人前列腺癌細胞系、人惡性膠質瘤細胞系、人肺癌細胞系、人結腸癌細胞系、人胃癌細胞系、人腎癌細胞系、人舌癌細胞系、人黑色素瘤細胞系、小鼠黑色素瘤細胞系或中國倉鼠卵巢細胞系。

13.經修飾而能產生GFP的腫瘤細胞，所述的腫瘤細胞被含有如下核苷酸序列的表達載體所轉染，所述核苷酸序列編碼GFP還編碼治療蛋白或無限繁殖化蛋白。

14.制備含有表達GFP的腫瘤的脊椎動物的方法，所述方法包括給脊椎動物皮下注射權利要求10所述的腫瘤細胞，注射量足以在所述動物內產生腫瘤，該方法或者包括在所述動物體內引入所述GFP的逆轉錄病毒表達系統。

15.一種含有轉移性腫瘤細胞的脊椎動物組織或由這種組織制得的組織培養物，其中所述的腫瘤細胞產生GFP。

16.一種觀察脊椎動物腫瘤中血管形成的方法，該方法包括可選性地暴露出所述動物的組織并觀察所述腫瘤中的血管，其中所述的血管通過對比染料的存在而可以看見，所述的腫瘤已經經修飾而能表達GFP。

17.一種無限繁殖細胞系，其中的細胞是經修飾而含有SV40-T抗原和可視量GFP的細胞系。