[發明專利]表達膽汁鹽刺激脂酶(BSSL)的DNA分子

無效

• 申請號: 96194083.2
• 申請日: 1996-03-12
• 公開（公告）號: CN1185812A
• 公開（公告）日: 1998-06-24
• 發明（設計）人: G·達斯
• 申請（專利權）人: 阿斯特拉公司
• 主分類號: C12N15/81
• 分類號: C12N15/81;C12N9/20;C12N1/19
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司
• 代理人: 盧新華,譚明勝

1.一種DNA分子，包括

(a)編碼為人BSSL或其生物活性變異體的多肽的區域；

(b)與所述多肽編碼區的5′末端相連的，編碼能操縱所述多肽從用所述DNA分子轉化的巴斯德畢赤酵母細胞分泌的信號肽的區域；

(c)可操作性地與(a)和(b)中定義的所述編碼區相連的巴斯德畢赤酵母的甲醇氧化酶啟動子或功能相同的啟動子。

2.根據權利要求1的DNA分子，其中所述信號肽與序列表中SEQ?IDNO：2的氨基酸-20至-1所示的氨基酸序列相同或基本類似。

3.根據權利要求1的DNA分子，其中所述信號肽包含啤酒糖酵母轉化酶信號肽。

4.根據權利要求1-3任一項的編碼人BSSL生物活性變異體的DNA分子，其中缺失至少一個11個氨基酸的重復單元，所述重復單元示于SEQ?ID?NO：1中。

5.根據權利要求1-4任一項的DNA分子，其編碼具有BSSL活性并具有與SEQ?ID?NO：3或SEQ?ID?NO：4的序列存在至少95％同源性的氨基酸序列的多肽。

6.根據權利要求1-5任一項的DNA分子，其編碼具有SEQ?ID?NO：3或SEQ?ID?NO：4的氨基酸序列的多肽。

7.一種載體，包含根據權利要求1-6任一項的DNA分子。

8.根據權利要求7的可復制表達載體，它能介導巴斯德畢赤酵母細胞中人BSSL或其生物活性變異體的表達。

9.根據權利要求8的載體，其為質粒載體pARC?5771(NCIMB40721)，pARC?5799(NCIMB，40723)或pARC?5797(NCIMB40722)。

10.用根據權利要求7-9任一項的載體轉化的畢赤酵母屬的宿主細胞。

11.根據權利要求10的宿主細胞，為巴斯德畢赤酵母細胞。

12.根據權利要求11的宿主細胞，巴斯德畢赤酵母細胞GS115株。

13.根據權利要求12的宿主細胞，為PPF-1[pARC?5771](NCIMB40721)，GS115[pARC?5799](NCIMB?40723)或GS115[pARC?5797](NCIMB?40722)。

14.一種制備人BSSL或其生物活性變異體的多肽的方法，包括在使所述多肽分泌到培養基中的條件下培養根據權利要求10-13任一項的宿主細胞，并從培養基中回收所述多肽。