[發明專利]一種在基因治療載體制劑中測定功能失活基因之數量的快速檢驗方法

無效

• 申請號: 96192612.0
• 申請日: 1996-02-14
• 公開（公告）號: CN1178557A
• 公開（公告）日: 1998-04-08
• 發明（設計）人: J·羅斯;張維維;B·托奎;L·布哈克
• 申請（專利權）人: 德克薩斯州立大學董事會;羅納－布朗克羅萊爾股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/18
• 分類號: C12Q1/18
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所
• 代理人: 李瑛

1.一種用于測定在樣品載體貯存物中缺損的載體百分比的方法，其中至少在所說的貯存物中的某些載體攜帶效應基因，該基因編碼抑制腫瘤細胞生長、引起腫瘤細胞編程性細胞死亡或者殺死腫瘤細胞的產物，該方法包括下列步驟：

a)把腫瘤細胞與所說的樣品載體貯存物在允許所說的貯存物引入到所說的細胞的條件下接觸；

b)在允許所說的腫瘤細胞生長的條件下培養所說的細胞；

c)在足夠長的一段培養時間后評價腫瘤細胞的生長；

d)把腫瘤細胞的生長和與一種或多種試驗標準貯存物接觸的細胞的生長相比較，所說的標準貯存物包含攜帶功能效應基因的陽性對照載體和不攜帶功能效應基因的陰性對照載體。

2.權利要求1的方法，其中所說的陰性對照載體編碼指示基因。

3.權利要求1的方法，其中所說的指示基因是蟲熒光素酶基因。

4.權利要求1的方法，其中所說的載體是腺病毒、逆轉錄病毒、牛痘病毒或腺相關病毒載體。

5.權利要求5的方法，其中所說的載體是腺病毒載體。

6.權利要求5的方法，其中所說的腺病毒載體包含在傳染性腺病毒粒子中。

7.權利要求1的方法，其中所說的效應基因是腫瘤抑制基因。

8.權利要求1的方法，其中所說的效應基因引起編程性細胞死亡。

9.權利要求8的方法，其中所說的腫瘤抑制基因是野生型p53基因。

10.權利要求9的方法，其中所說的腫瘤細胞是肺、結腸、乳房、胰、前列腺、頭頸和皮膚癌細胞。

11.權利要求1的方法，其中所說的缺損載體的百分比大于0.05％。

12.權利要求1的方法，其中所說的缺損載體的百分比在0.05％至10％之間。

13.權利要求1的方法，其中所說的一段時間是在2至10天之間。

14.權利要求13的方法，其中所說的一段時間是在3至5天之間。

15.權利要求1的方法，其中所說的試驗標準貯存物包括選自由0％、0.1％、0.5％、1.0％、2.0％、5.0％、10％、20％和100％組成的組的一種或多種百分比的缺損載體。

16.一種試劑盒，該試劑盒包含：

至少一個容器，其中所說的容器包含一種試驗標準貯存物樣品，其中至少貯存物中的某些載體是攜帶指示基因的陰性對照載體。

17.權利要求16的試劑盒，該試劑盒還包含至少另一個容器，所說的第二個容器包含主要由陽性對照載體構成的試驗標準貯存物。

18.權利要求17的試劑盒，其中所說的容器包含陽性對照載體和陰性對照載體的試驗標準貯存物混合物，含有預定的百分比的每一種載體。

19.權利要求18的試劑盒，其中所說的標準貯存物混合物包括選自由0.1％、0.5％、1.0％、2.0％、5.0％、10％和20％載體組成的組的一種或多種百分比的編碼指示基因的載體。

20.權利要求16的試劑盒，其中所說的指示基因編碼蟲熒光素酶。

21.權利要求16的試劑盒，其中所說的載體是腺病毒。