[發明專利]冷凍保存溶液

無效

• 申請號: 96192425.X
• 申請日: 1996-03-07
• 公開（公告）號: CN1177905A
• 公開（公告）日: 1998-04-01
• 發明（設計）人: M·R·波洛維那
• 申請（專利權）人: 切洛克斯實驗室股份有限公司
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02;G01N33/53;C12N5/00
• 代理公司: 上海專利商標事務所
• 代理人: 陳文青

技術領域

本發明涉及冷凍保存溶液。更具體地說，本發明是特別適用于冷凍保存各種血液循環細胞和骨髓細胞，例如造血干細胞和祖細胞的冷凍保存溶液。

本發明還涉及冷凍保存細胞和恢復經冷凍保存的細胞的方法。

技術背景

血液

具有可識別形態和不同功能的血循環細胞包括紅細胞，嗜中性、嗜酸性和嗜堿性粒細胞，B淋巴細胞，T淋巴細胞，非B淋巴細胞，非T淋巴細胞和血小板。這些成熟細胞來源于各譜系具有可識別形態的分裂的前體細胞，且于需要時可由它們取代，這些前體細胞例如有紅細胞系的成紅細胞，粒細胞系的成髓細胞、前髓細胞和髓細胞，以及血小板系的巨核細胞。

造血干細胞和祖細胞

前體細胞來自可簡單分為兩亞群的更原始的細胞：干細胞和祖細胞。對干細胞和祖細胞的定義是操作型的，取決于功能標準而不是其形態標準。有些干細胞在需要時發生分化，但是有些干細胞或其子代細胞生成別的干細胞以維持寶貴的這類細胞的集合。這樣，多能干細胞除了能夠維持自己的種系之外，還能夠分化成幾個亞系的、具有較為有限的自我更新能力或沒有自我更新能力的祖細胞。由這些祖細胞最終產生具有可識別形態的前體細胞。祖細胞能夠增殖和沿一種或多種髓細胞樣分化途徑進行分化。

干細胞和祖細胞在骨髓、脾臟和血液中的有核細胞中占很小的百分比。存在于脾臟中的這些細胞比骨髓中的約少10倍，成人血液中甚至更少。例如，有核骨髓細胞中約有千分之一是祖細胞；干細胞更少。

已經能夠通過骨髓移植來再建造血系統。Lorenz及其同事證明，通過靜脈輸注骨髓可以保護小鼠抵抗致死量的輻射(Lorenz，20E，等，1951，國立癌癥研究所雜志(J.Natl.Cancer?Inst.)12：197-201)。以后的研究表明，保護作用來自輸注的細胞在受體骨髓中的定居(Lindsley，D.L.，等，1955，實驗生物學與醫學會記事(Proc.Sco.Exp.Biol.Med.)90：512-515；Nowell，P.C.，等，1956，(癌癥研究(CancerRes.)16：258-261；Mitchison，N.A.，1956，英國實驗病理學雜志(Br.J.Exp.Pathol.)37：239-247；Thomas，E.D.等，1957，新英格蘭醫學雜志(N.Engl.J.Med.)257：491-496)。這樣，供體骨髓中的干細胞和祖細胞能夠增殖和取代負責保護性免疫、組織修復、凝血和其它血液功能的血細胞。在成功的骨髓移植中，血液、骨髓、脾臟、胸腺和其它免疫器官中都重新集合了來自供體的細胞。

骨髓移植已越來越成功地被用于治療許多致死或致殘的疾病，其中包括某些類型的貧血，例如再生障礙性貧血(Thomas，E.D.等，1972年2月5日，柳葉刀(TheLancet)pp.284-289)，范康尼氏貧血(Gluckman，E.等，1980，英國血液學雜志(Brit?J.Haematol.)45：557-564；Gluckman，E.等，1983，英國血液雜志(Brit?J.Haematol.)54：431-440；Gluckman，E.等，1984，血液學評論(Seminars?inHematology)：21(1)：20-26)，免疫缺陷(Good，R.A.等，1985，細胞免疫學(CellularImmunol.)82：36-54)，癌癥，例如淋巴瘤和白血病(Cahn，J.Y.等，1986，英國血液學雜志(Brit?J.Haematol.)63：457-470；Blume，K.J.和Forman?S.J.，1982，細胞生理學雜志增刊(J.Cell.Physiol.Supp.)1：99-102；Cheever，M.A.等，1982，新英格蘭醫學雜志(N.Engl.J.Med.)307(8)：479-481)，癌(Blijham，G等，1981歐洲癌癥雜志(Eur.J.Cancer)17(4)：433-441)，各種實體瘤(Ekert，H.等，1982，癌癥(Cancer)49：603-609；Spitzer，G.等，1980，癌癥(Cancer)45：3075-3085)，以及各種造血遺傳疾病。