[發(fā)明專利]冷凍保存溶液無效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 96192425.X | 申請(qǐng)日: | 1996-03-07 |
| 公開(公告)號(hào): | CN1177905A | 公開(公告)日: | 1998-04-01 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | M·R·波洛維那 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 切洛克斯實(shí)驗(yàn)室股份有限公司 |
| 主分類號(hào): | A01N1/02 | 分類號(hào): | A01N1/02;G01N33/53;C12N5/00 |
| 代理公司: | 上海專利商標(biāo)事務(wù)所 | 代理人: | 陳文青 |
| 地址: | 美國(guó)明*** | 國(guó)省代碼: | 暫無信息 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 冷凍 保存 溶液 | ||
1.一種濃縮冷凍保存溶液,主要包含:
(a)甘油;
(b)對(duì)提高細(xì)胞存活率來說為有效量的堿金屬氯化物;
(c)對(duì)在環(huán)境條件下細(xì)胞的維持來說為有效量的可生物代謝的單糖;
(d)對(duì)保護(hù)質(zhì)膜完整性來說為有效量的血清白蛋白。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的冷凍保存溶液,其中還包括稀釋劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的冷凍保存溶液,溶液的pH在約7至7.5之間。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的冷凍保存溶液,其中的濃縮液主要包含(a)約60至約80重量%甘油,(b)約5至約10重量%堿金屬氯化物,(c)約0.2至約1重量%單糖和(d)約20至約30重量%血清白蛋白。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的冷凍保存溶液,其中的溶液主要包含(a)約20至約40重量%甘油,(b)約1.5至約5重量%堿金屬氯化物,(c)約0.1至約0.5重量%單糖,(d)約6至約15重量%血清白蛋白和(e)余量的稀釋劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的濃縮冷凍保存溶液,其中的堿金屬氯化物是氯化鈉。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的冷凍保存溶液,其中的堿金屬氯化物是氯化鈉。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的濃縮冷凍保存溶液,其中的單糖是葡萄糖。
9.根據(jù)權(quán)利要求2所述的冷凍保存溶液,其中的單糖是葡萄糖。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的濃縮冷凍保存溶液,其中的血清白蛋白是人血清白蛋白。
11.根據(jù)權(quán)利要求2所述的冷凍保存溶液,其中的血清白蛋白是人血清白蛋白。
12.一種濃縮冷凍保存溶液,主要包含:
(a)約60至80重量%甘油;
(b)約5至10重量%堿金屬氯化物;
(c)約0.2至1重量%葡萄糖;
(d)約20至30重量%血清白蛋白。
13.一種冷凍保存溶液,主要包含:
(a)約20至40重量%甘油;
(b)約1.5至5重量%堿金屬氯化物;
(c)約0.1至0.5重量%葡萄糖;
(d)約6至1?5重量%血清白蛋白;
(e)余量的稀釋劑。
14.一種冷凍保存細(xì)胞的方法,包括(i)將靶細(xì)胞加入權(quán)利要求2所述的冷凍保存溶液中和(ii)冷凍保存被保護(hù)的靶細(xì)胞。
15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法,其中含有靶細(xì)胞的溶液與冷凍保存溶液的體積比在約1∶1至1∶10之間,靶細(xì)胞與冷凍保存溶液之比在約1×105個(gè)細(xì)胞/ml至約1×109個(gè)細(xì)胞/ml之間。
16.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法,其中的靶細(xì)胞是造血干細(xì)胞或祖細(xì)胞。
17.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法,其中的靶細(xì)胞是血小板細(xì)胞。
18.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法,其中的靶細(xì)胞是CD34+細(xì)胞。
19.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法,其中的靶細(xì)胞來自臍帶血。
20.一種冷凍保存細(xì)胞的方法,包括(i)將靶細(xì)胞加入權(quán)利要求13所述的冷凍保存溶液中和(ii)冷凍保存被保護(hù)的靶細(xì)胞。
21.根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法,其中含有靶細(xì)胞的溶液與冷凍保存溶液的體積比在約1∶1至1∶10之間,靶細(xì)胞與冷凍保存溶液之比在約1×105個(gè)細(xì)胞/ml至約1×109個(gè)細(xì)胞/ml之間。
22.根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法,其中以1-2℃/分鐘的速度將被保護(hù)的靶細(xì)胞冷卻至約-70至-196℃。
23.一種冷凍保存和恢復(fù)活細(xì)胞的方法,包括(i)將靶細(xì)胞加入權(quán)利要求2所述的冷凍保存溶液中,(ii)冷凍保存被保護(hù)的靶細(xì)胞和(iii)使被保護(hù)的細(xì)胞解凍。
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