[發(fā)明專利]卵白蛋白酶解物及其制備方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 96119603.3 | 申請日: | 1996-09-01 |
| 公開(公告)號: | CN1175360A | 公開(公告)日: | 1998-03-11 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 魏劍鳴 | 申請(專利權(quán))人: | 魏劍鳴 |
| 主分類號: | A23J1/08 | 分類號: | A23J1/08;C12P1/00 |
| 代理公司: | 武漢市專利事務(wù)所 | 代理人: | 樊戎 |
| 地址: | 430010 湖北*** | 國省代碼: | 湖北;42 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 卵白 蛋白酶 及其 制備 方法 | ||
本發(fā)明涉及一種蛋白質(zhì)酶解物及其制備方法。
白蛋白是一種十分重要的蛋白質(zhì),廣泛存在于人和動物的血清中,其主要功能是維持血漿膠體滲透壓,增加血溶量,可用于治療低白蛋白血癥患者,如嚴(yán)重的肝藏疾病及由低白蛋白引起的水腫和腹水等,臨床上主要是采用注射人血清白蛋白的方法治療,此法除價格昂貴外,其最大弊端是容易引起血源性疾病,如艾滋病、乙肝等,給患者造成極大的不可逆的危害。而科學(xué)研究已證明蛋中的卵白蛋白與人血清白蛋白的氨基酸組成成份極為相似(見表1),僅由于其分子量較大(43000~49000),不易被人體的胃腸及細(xì)胞所吸收,影響了卵白蛋白制品的開發(fā)和應(yīng)用,為此,人們提出了多種將卵白蛋白水解成易被人體吸收和利用的氨基酸和小分子多肽的方法,如1、酸或堿水解法,該法往往會造成氨基酸部分或全部被破壞,并且會增加分離純化工作的難度及造成環(huán)境污染;2、酶水解法,如中國CN1101377A號介紹的木瓜蛋白酶水解法,該法雖然能夠克服酸或堿水解法的缺點,有利形成小分子多肽,但工藝較復(fù)雜,酶解接觸面較小,酶的切位點亦較少,使得酶解不充分,細(xì)化程度較低,尤其是其酶解物在胃腸道內(nèi)的吸收率不高。
本發(fā)明的目的是提供一種制造成本低、無毒付作用,小分子多肽和氨基酸的含量高、且在胃腸道內(nèi)的吸收率高的卵白蛋白酶解物及其生產(chǎn)工藝簡單、酶解切位點多、酶解充分、細(xì)化程度高的制備方法。
本發(fā)明采用的酶為從動物胰臟中提取的胰酶,其中含有胰蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶及胰凝乳蛋白酶等成份。由于該酶是一種混合酶,因此酶解切位點多,能使肽健中堿性氨基酸的羧基端同基它氨基酸的氨基形成的肽鍵水解,其酶解碎片C末端是賴氨酸或精氨酸,使芳香族氨基酸的羧基端的肽鍵水解,其酶解碎片羧基末端是苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸,還能水解蛋白質(zhì)中的酰胺類和脂類等化合物。尤其是采用胰酶所得到的酶解物中的小分子多肽的含量較高,使得酶解物在胃腸道內(nèi)的吸收率高于木瓜蛋白酶酶解物和游離氨基酸的吸收率,這是因為科學(xué)研究證實小腸除具有游離氨基酸運輸體系外,更具有特異的小分子多肽運輸體系,其吸收機制包括1、小分子多肽在細(xì)胞表面(刷狀緣)水解為氨基酸、其水解率很高;2、進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)水解為氨基酸;3、經(jīng)上皮脫屑細(xì)胞水解為氨基酸。
本發(fā)明的卵白蛋白酶解物所含的氨基酸的分子量在1000以下,氨基酸的含量為(mg/100mg):賴氨酸2.72~6.02、組氨酸0.88~1.8、精氨酸1.41~2.25、蘇氨酸1.42~3.93、絲氨酸0.58~5.4、谷氨酸2.02~13.72、脯氨酸1.59~2.02、甘氨酸0.14~3.17、丙氨酸1.63~6.27、胱氨酸0.25、纈氨酸2.48~5.84,異亮氨酸1.81~5.42、亮氨酸5.0~7.56、酪氨酸0.21~0.58、苯丙氨酸4.45、蛋氨酸2.42~3.49、天門冬氨酸6.66~8.54,氨基酸總量為30.97~80.71mg/100mg。
本發(fā)明是這樣實現(xiàn)的:先將經(jīng)加熱變性處理并去掉蛋黃和蛋殼的卵白蛋白加水?dāng)嚢璩扇闋睿缓笤跍囟葹?5℃±1℃、PH值為7~8的條件下加胰酶進(jìn)行酶解,酶解時間為7~8小時,最后將酶解液離心分離成清液和殘渣,去掉殘渣,將清液加熱至沸后冷卻至室溫備用。
將上述備用清液進(jìn)行噴霧干燥濃縮即得粉狀卵白蛋白酶解物。
由于本發(fā)明在酶解前對卵白蛋白進(jìn)行了加熱變性處理,因此酶解接觸面大,從而保證酶解充分、細(xì)化程度高。按照上述方法制備的卵白蛋白酶解物中的小分子多肽的含量采用G15方法檢測可達(dá)到70%以上,最大一個分子團(tuán)的分子量約為3500,其余的分子量均在1000以下。其酶解物可作為保健品添加劑,制成口服液或膠囊,其殘渣可作為飼料用。
附圖為本發(fā)明工藝流程框圖。
實施例1:取雞蛋5Kg,加熱變性后去掉蛋黃和蛋殼,將蛋白加水后用攪拌機將其攪成乳狀,在溫度為55℃±1℃、PH值為7~8的條件下加胰酶32g(藥用級)酶解8小時,用離心機分離清液和殘渣,去掉殘渣,將清液加熱至沸后冷卻至室溫,最后采用噴霧干燥法濃縮清液即得到190g粉狀卵白蛋白酶解物,取100g酶解物用氨基酸自動分析儀檢測,其測定結(jié)果見表2的測定結(jié)果1。
實施例2:
取雞蛋3kg,胰酶18g、酶解時間7小時,其它條件和操作步驟同例1,得粉狀卵白蛋白酶解物110g,其測定結(jié)果見表2的測定結(jié)果2。
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