[發(fā)明專利]一種新的人紅細(xì)胞生成素無效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 96115004.1 | 申請(qǐng)日: | 1996-01-05 |
| 公開(公告)號(hào): | CN1143116A | 公開(公告)日: | 1997-02-19 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 婁丹;徐莉萍;鄒鐘誠(chéng) | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 沈陽三生藥業(yè)有限公司 |
| 主分類號(hào): | C12P21/02 | 分類號(hào): | C12P21/02;C12N15/12;C12N15/63;C12N5/18;A61K38/18 |
| 代理公司: | 沈陽市專利事務(wù)所 | 代理人: | 楊濱 |
| 地址: | 110001 遼*** | 國(guó)省代碼: | 遼寧;21 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 紅細(xì)胞 生成 | ||
1.一種人紅細(xì)胞生成素蛋白,其特征是:(1)SDS-PAGE表觀分子量為36~45KD(2)肽鏈部分為???????????????????APP??RLICDSRVLE??RYLLEAKEAENITTGCAEHC??SLNFNITVPD??TKVNFYAWKR??MEVGQQAVEV??WQGLALLSEAVLRGQALLVN??SSQPWEPLQL??HVDKAVSGLR??SLTTLLRALR??AQKEAISPPDAASAAPLRTI??TADFFRKLFR??VYSNFLRGKL??KLYTGEACRT??GDR
(3)第113位氨基酸殘基為Arg
(4)由CHO細(xì)胞表達(dá),為一糖蛋白。
2.紅細(xì)胞生成素蛋白的衍生物,其特征是:由權(quán)利要求1中的全部或部分氨基酸序列組成,具有人紅細(xì)胞生成素活性,包括糖基化形式及非糖基化形式。
3.一種編碼人紅細(xì)胞生成素的DNA分子,其特征是:
(1)其全序列為:????????????????ATGGGGGTG?CACGAATGTCCTGCCTGGCT?GTGGCTTCTC?CTGTCCCTGC?TGTCGCTCCC?TCTGGGCCTCCCAGTCCTGG?GCGCCCCACC?ACGCCTCATC?TGTGACAGCC?GAGTCCTGGAGAGGTACCTC?TTGGAGGCCA?AGGAGGCCGA?GAATATCACG?ACGGGCTGTGCTGAACACTG?CAGCTTGAAT?GAGAATATCA?CTGTCCCAGA?CACCAAAGTTAATTTCTATG?CCTGGAAGAG?GATGGAGGTC?GGGCAGCAGG?CCGTAGAAGTCTGGCAGGCC?CTGGCCCTGC?TGTCGGAACC?TGTCCTGCGG?GGCCAGGCCCTGTTGGTCAA?CTCTTCCCAG?CCGTGGGAGC?CCCTGCAGCT?GCATGTGGATAAAGCCGTCA?GTGGCCTTCG?CAGCCTCACC?ACTCTGCTTC?GGGCTCTGCGAGCCCAGAAG?GAAGCCATCT?CCCCTCCAGA?TGCGGCCTCA?GCTGCTCCACTCCGAACAAT?CACTGCTGAC?ACTTTCCGCA?AACTCTTCCG?AGTCTACTCCAATTTCCTCC?GGGGAAAGCT?GAAGCTGTAC?ACAGGGGAGG?CCTGCAGGACAGGGGACAGA
(2)第418位堿基為C
4.一種新的重組質(zhì)粒pE/C,其特征是:
(1)該質(zhì)粒由表1.中的6079個(gè)堿基組成
(2)該質(zhì)粒中第899-1477個(gè)堿基為權(quán)利要求3中的DNA分子
(3)該質(zhì)粒與質(zhì)粒pDHFR共轉(zhuǎn)染二氫葉酸還原酶缺陷型的中國(guó)倉鼠卵巢細(xì)胞,可用于表達(dá)權(quán)利要求1中的人紅細(xì)胞生成素。這里的質(zhì)粒pDHFR購自Invitrogen。
5.表達(dá)人紅細(xì)胞生成素的基因工程細(xì)胞株,其特征是:
(1)由權(quán)利要求4中的質(zhì)粒pE/C與質(zhì)粒pDHFR共轉(zhuǎn)染二氫葉酸還原酶缺陷型中國(guó)倉鼠卵巢細(xì)胞得到。這里的質(zhì)粒pDHFR購自Invitrogen,中國(guó)倉鼠卵巢細(xì)胞購自美國(guó)菌種保藏中心。
(2)經(jīng)培養(yǎng)可以表達(dá)權(quán)利要求1中的人紅細(xì)胞生成素。
(3)該細(xì)胞株對(duì)權(quán)利要求1中的人紅細(xì)胞生成素的表達(dá)量達(dá)到10000U/ml.106細(xì)胞。
6.一種具有人紅細(xì)胞生成素活性的藥品,其特征是:權(quán)利要求1或2中的蛋白作為該藥品的全部或部分活性組分。
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