[發(fā)明專利]編碼ＢａlＩ限制－修飾系統(tǒng)酶的基因

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 96105959.1
• 申請(qǐng)日: 1996-02-02
• 公開（公告）號(hào): CN1101469C
• 公開（公告）日: 2003-02-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: Ｈ·上野;石野良純;加藤郁之進(jìn)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 寶酒造株式會(huì)社
• 主分類號(hào): C12N15/52
• 分類號(hào): C12N15/52;C12N15/60;C12N15/63;C12N9/88;//;C12R113);C12R113)
• 代理公司: 中國(guó)專利代理(香港)有限公司
• 代理人: 姜建成

1.一種分離的BalI限制酶基因，該基因選自：

(a)可以從質(zhì)粒pSRB8獲得的基因；

(b)編碼具有BalI限制酶活性的SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列或其部分的基因；

(c)編碼具有BalI限制酶活性的多肽且具有SEQ?ID?NO：2所示核苷酸序列或其部分的基因；

(d)編碼具有BalI限制酶活性的多肽且具有SEQ?ID?NO：2所示核苷酸序列或其部分的基因，其中核苷酸1的G由A取代；

(e)可與編碼具有BalI限制酶活性的多肽且具有SEQ?ID?NO：2所示核苷酸序列的基因在以下條件下雜交的基因：于65℃下在含有6×SSC、1％十二烷基硫酸鈉、鮭精子DNA?100ug/ml、5×Denhardt′s的溶液中雜交20小時(shí)，其中1×SSC是通過(guò)將NaCl8.76g和檸檬酸鈉4.41g溶解于1升水中而制得的，5×Denhardt′s中含有0.1％小牛血清白蛋白、0.1％聚乙烯吡咯烷酮和0.1％Ficoll。

2.根據(jù)權(quán)利要求1的基因，該基因可從微白短桿菌ATCC15831中得到。

3.一種分離的BalI修飾酶基因，該基因選自：

(a)可以從質(zhì)粒pBSR1獲得的基因；

(b)編碼具有BalI修飾酶活性的SEQ?ID?NO：3所示氨基酸序列或其部分的基因；

(c)編碼具有BalI修飾酶活性的多肽且具有SEQ?ID?NO：4所示核苷酸序列或其部分的基因；

(d)可與編碼具有BalI修飾酶活性的多肽且具有SEQ?ID?NO：4所示核苷酸序列的基因在以下條件下雜交的基因：于65℃下在含有6×SSC、1％十二烷基硫酸鈉、鮭精子DNA?100ug/ml、5×Denhardt′s的溶液中雜交20小時(shí)，其中1×SSC是通過(guò)將NaCl8.76g和檸檬酸鈉4.41g溶解于1升水中而制得的，5×Denhardt′s中含有0.1％小牛血清白蛋白、0.1％聚乙烯吡咯烷酮和0.1％Ficoll。

4.根據(jù)權(quán)利要求3的基因，該基因可從微白短桿菌ATCC?15831中得到。

5.一種載體，該載體含有權(quán)利要求1或2的基因。

6.一種載體，該載體含有權(quán)利要求3或4的基因。

7.一種載體，該載體含有權(quán)利要求1或2的基因和權(quán)利要求3或4的基因。

8.一種能夠生產(chǎn)BalI限制酶的轉(zhuǎn)化子，該轉(zhuǎn)化子是用權(quán)利要求5的載體和權(quán)利要求6的載體轉(zhuǎn)化的。

9.一種能夠生產(chǎn)BalI限制酶的轉(zhuǎn)化子，該轉(zhuǎn)化子是用權(quán)利要求7的載體轉(zhuǎn)化的。

10.一種生產(chǎn)BalI限制酶的方法，該方法包括培養(yǎng)權(quán)利要求8或9的轉(zhuǎn)化子，并從培養(yǎng)液中收集BalI限制酶。