[發(fā)明專利]酵母菌Cu-金屬硫蛋白及其生產(chǎn)方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 96100897.0
• 申請(qǐng)日: 1996-02-06
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN1062306C
• 公開(kāi)（公告）日: 2001-02-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 林稚蘭
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N1/16
• 分類號(hào): C12N1/16;C12N15/01;C12N13/00;C12P21/00;//;C12R1865)
• 代理公司: 北京大學(xué)專利事務(wù)所
• 代理人: 孫博寧

1．一種酵母菌的Cu-金屬硫蛋白，簡(jiǎn)稱MT，該蛋白由釀酒酵母Saccharomyces?cerevisiaeBD101菌株CGMCC0251產(chǎn)生，其表觀分子量14000道爾頓。由59個(gè)氨基酸組成，半胱氨酸含量10％，芳香組氨基酸含量≤1％，每克分子Cu-金屬硫蛋白含4克原子Cu。

2．權(quán)利要求1所述Cu-金屬硫蛋白的生產(chǎn)方法，該方法特征在于包括用Cu鹽分級(jí)誘導(dǎo)釀酒酵母BD101發(fā)酵培養(yǎng)以及由發(fā)酵液提取純化該蛋白。

3．根據(jù)權(quán)利要求2的方法，其中所述發(fā)酵培養(yǎng)在如下條件進(jìn)行：誘導(dǎo)劑：CuSO₄或CuCl₂，濃度為5mmol/L。培養(yǎng)基pH：5.0～7.0，培養(yǎng)溫度：30±2℃，培養(yǎng)時(shí)間：24小時(shí)，接種量：1～10％，通風(fēng)比：1∶1.0(vvm)～1∶1.2(vvm)，攪拌速度：5～15轉(zhuǎn)/秒。

4．根據(jù)權(quán)利要求2的方法，其中所述提取純化步驟包括：發(fā)酵液離心收集菌體，洗滌三次，用超聲波發(fā)生器或高壓勻漿器破碎細(xì)胞，75～80℃加熱，離心，上清液經(jīng)三次凝膠過(guò)濾層析和親和層析，收集A₂₇₀＞A₂₈₀富含Cu-金屬硫蛋白的組分，該組分經(jīng)冰凍干躁獲得純Cu-金屬硫蛋白。

5．權(quán)利要求1所述Cu-金屬硫蛋白的用途，包括用于拮抗⁶⁰Coγ射線輻射損傷，消除羥基自由基和重金屬解毒。