[發明專利]利用9、10-二氫化吖啶的水解酶的化學發光檢測

無效

• 申請號: 95194805.9
• 申請日: 1995-08-30
• 公開（公告）號: CN1156506A
• 公開（公告）日: 1997-08-06
• 發明（設計）人: 哈謝姆·阿克哈溫-塔夫蒂;扎拉·阿戈哈瓦尼;雷努卡·德席爾瓦
• 申請（專利權）人: 魯米根公司
• 主分類號: G01N33/535
• 分類號: G01N33/535
• 代理公司: 柳沈知識產權律師事務所
• 代理人: 巫肖南

1、一種用于產生化學發光的方法，該方法包括使一種水解酶與一種被護增強子、一種過氧化物、一種過氧化物酶以及一種9、10-二氫化吖啶的化合物起反應，該9、10-二氫化吖啶化合物與過氧化物和過氧化酶反應產生光，其中被護增強化合物分子式為ArOX，其中X為一個與水解酶反應的離去基團，Ar選自取代的苯基、萘基和取代的萘基，其中水解酶與被護增強化合物反應以除去X，因而，與無增強化合物時產生的光水平相比較，增加了9、10-二氫化吖啶化合物產生的光的水平。

2、根據權利要求1的方法，還進一步包括：

(a)使水解酶與被護增強子在水溶液中反應第一段時間；然后

(b)將含水解酶和被護增強子的溶液與一種含9、10-二氫化吖啶、過氧化物化合物和過氧化物酶的溶液混合以產生光。

3、根據權利要求1的方法，其中9、10-二氫化吖啶的分子式為：其中R選自烷基、雜烷基和芳烷基，其中R₁-R₈獨立地選自于產生光的基團，其中Y為一個離去基團。

4、根據權利要求3的方法，其中Y選自于芳氧基團、取代的芳氧基團、芳硫基團、取代的芳硫基團和磺酰亞胺(sulfonimide)基團。

5、根據權利要求3的方法，其中Y為被取代了的芳氧基團。

6、根據權利要求5的方法，其中被取代了的芳氧基團為鹵素取代了的苯氧基團。

7、根據權利要求3的方法，其中R₁-R₈至少有一個基團為C₁-C₂₀烷氧基團，并且其中R為C₁-C₂₀烷基。

8、根據權利要求1的方法，其中9、10-二氫化吖啶為2′、3′、6′-三氟苯基3-甲氧基-10-甲基-9、10-二氫化吖啶-9-羧酸酯。

9、根據權利要求1的方法，其中水解酶被結合到一個特殊結合對的鏈節上，其中特殊結合對選自半抗原、抗原、抗體、蛋白質、寡核苷酸和核酸。

10、一種在分析過程中利用化學發光反應檢測被分析物的存在或量的方法，該方法包括：

(a)使水解酶與被護增強子、過氧化物化合物、過氧化物酶和9、10-二氫化吖啶化合物反應，9、10-二氫化吖啶化合物與過氧化物化合物和過氧化物酶反應產生光，其中被護增強化合物分子式為ArOX，其中X為一個與水解酶反應的離去基團，Ar選自取代的苯基、萘基和取代的萘基，其中水解酶與被護增強化合物反應以除去X，因而，與無增強化合物時產光水平相比較，增加了由9、10-二氫化吖啶化合物產生光的水平。

(b)使所產生的光的量與分析物的存在和量建立聯系。

11、根據權利要求10的方法，其中9、10-二氫化吖啶的分子式為：其中R選自烷基、雜烷基和芳烷基、其中R₁-R₈獨立地選自于產生光的基團，其中Y為離去基團。

12、根據權利要求11的方法，其中Y選自芳氧基團、被取代了的芳氧基團、芳硫基團、被取代了的芳硫基團和磺酰亞胺基團。

13、根據權利要求11的方法，其中基團Y為被取代了的芳氧基團。

14、根據權利要求13的方法，其中被取代的芳氧基團為鹵素取代了的苯氧基團。

15、根據權利要求11的方法，其中R₁-R₈中至少之一為C₁-C₂₀烷氧基團，并且其中R為C₁-C₂₀烷基。

16、根據權利要求11的方法，其中9、10-二氫化吖啶為2′、3′、6′-三氟苯基3-甲氧基-10-甲基-9、10-二氫化吖啶-9-羧酸酯。

17、根據權利要求10的方法，其中被分析物為水解酶。

18、根據權利要求10的方法，其中水解酶被連結到特殊結合對的鏈節上，其中特殊結合對選自半抗原、抗原、抗體和寡核苷酸。