[發明專利]從細菌中提取異源不溶性蛋白質

無效

• 申請號: 95194734.6
• 申請日: 1995-06-19
• 公開（公告）號: CN1156481A
• 公開（公告）日: 1997-08-06
• 發明（設計）人: Y·阿爾羅伊;J·朱;R·康登
• 申請（專利權）人: 先靈公司
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10;C12N1/06;C07K1/14;C12P21/00
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司
• 代理人: 吳玉和,王景朝

1.一種從表達異源性蛋白質的細菌中提取該異源性蛋白質的方法，其包括如下步驟：

(a)在發酵液體培養基中發酵細菌；

(b)裂解包含在發酵液體培養基中的細菌；

(c)離心該發酵液體培養基，得到包涵體沉淀和上清液；

(d)除去上清液，得到分離的含有異源性蛋白質的包涵體沉淀。

2.一種從表達異源性蛋白質的細菌中提取該異源性蛋白質的方法，其包括如下步驟：

(a)在發酵液體培養基中發酵細菌；

(b)裂解包含在發酵液體培養基中的細菌；

(c)在大約0-15℃的溫度下冷卻或保持該發酵液體培養基；

(d)向該發酵液體培養基加入酸，使其pH達到大約2.0；

(e)在0-15℃的溫度下溫育被酸化的該發酵液體培養基，以殺滅所有殘存的未被裂解的細菌；

(f)離心發酵液體培養基，得到包涵體沉淀和上清液；

(g)從包涵體沉淀上除去上清液；

(h)將此包涵體沉淀懸浮在緩沖液中，得到懸浮液；

(i)將pH調整溶液加入到該懸浮液中，使懸浮液的pH達到6-9。

(j)裂解在步驟(i)的懸浮液中包含的懸浮固體；

(k)離心該懸浮液，得到含有異源性蛋白質的包涵體沉淀和上清液；

(l)除去上清液，得到分離的含有異源性蛋白質的包涵體。

3.權利要求2的方法，其中被酸化的發酵液體培養基被保持在0-25℃的溫度。

4.權利要求2的方法，其中步驟(d)中被酸化的發酵液體培養基，在離心之前，在0-15℃的溫度下溫育大約1小時。

5.權利要求2的方法，其中所用的酸選自磷酸，硝酸，鹽酸和硫酸。

6.一種從表達異源性蛋白質的細菌中提取該異源性蛋白質的方法，其基本上由如下步驟組成：

(a)在發酵液體培養基中發酵該細菌；

(b)裂解包含在發酵液體培養基中的細菌；

(c)在大約0-15℃的溫度下冷卻或保持該發酵液體培養基；

(e)將硝酸加入到該發酵液體培養基中，使其pH達到約2.0；

(f)在0-15℃的溫度下溫育被酸化的發酵液體培養基，以便殺滅細菌；

(g)使該液體培養基的pH升到大約8.5；

(h)使包含在該液體培養基中的固體裂解并分散開；

(i)離心該發酵液體培養基，得到上清液和含有包涵體的包涵體沉淀；

(j)除去上清液，得到分離的含有異源性蛋白質的包涵體。