[發(fā)明專利]含DNA損傷劑和P53的組合物

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 95192776.0
• 申請日: 1995-04-24
• 公開（公告）號: CN1147768A
• 公開（公告）日: 1997-04-16
• 發(fā)明（設計）人: J·A·羅斯;T·福基瓦拉;E·A·格里姆;T·穆克霍帕德亞;W·W·張;L·B·奧溫沙布
• 申請（專利權）人: 德克薩斯州立大學董事會
• 主分類號: A61K38/17
• 分類號: A61K38/17;//;3808;3324;3171;3170;31505;31475;3140)
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所
• 代理人: 張閩

本發(fā)明總的說來涉及的領域是改善化學治療性干預作用的新策略。從另外的方面講，本發(fā)明提供了將DNA損傷劑的效力與腫瘤抑制基因的聯(lián)合傳遞相結合的新方法和組合物。DNA損傷因子和腫瘤抑制基因異源表達的結合將產生優(yōu)于單個組分之作用的顯著協(xié)同作用。

當前，已知包括放射療法、外科手術和化學療法在內的癌癥治療方法的療效都是有限的。在美國，僅死于肺癌的人數(shù)每年都在140,000以上。最近，隨著年齡的變化而變化的肺癌死亡率在婦女中已超過了乳癌死亡率。盡管減少吸煙計劃的施行已降低了吸煙的盛行，但較高的肺癌死亡率將持續(xù)到21世紀。合理地開發(fā)新的肺癌療法將有賴于在分子水平上對肺癌生物學的了解。

目前已經明確，各種癌癥至少部分是由于遺傳異常所致，所述遺傳異常或者引起一種或多種基因的過度表達，或者引起異常或突變基因的表達。例如，在許多情況下，已知癌基因的表達會引起癌癥。“癌基因”是在遺傳上發(fā)生了改變的基因，其突變的表達產物以某種方式破壞正常的細胞功能或調控(Spandidos?et?al.，1989)。

已經發(fā)現(xiàn)，至今為止所研究的大多數(shù)癌基因被“激活”是突變的結果，所說突變通常是發(fā)生于正常細胞基因編碼區(qū)(即“原癌基因”)的點突變，導致被表達蛋白質產物中氨基酸的替換。這一被改變的表達產物表現(xiàn)出參予致癌過程的異常功能(Travali?et?al.，1990)。潛在的突變可以通過多種途徑引起，例如化學誘變或電離輻射。目前已鑒定了大量的癌基因和癌基因家族，包括ras、myc、Beu、raf、erb、src、fms、jun和abl，并在不同程度上對其特征進行了描述(Travali?etal.，1990；Bishop，1987)。

在正常的細胞生長過程中，據(jù)認為促生長原癌基因和抑生長的腫瘤抑制基因兩者是平衡的。數(shù)種因素可以引起這兩種力量失衡，從而導致形成致癌狀態(tài)。所述的因素之一就是腫瘤抑制基因的突變(Weinberg，1991)。

編碼細胞蛋白p53的基因是一種重要的腫瘤抑制基因，該p53蛋白是調控細胞增殖的53kD核磷蛋白。p53基因突變和等位基因從該基因所在的染色體17p上喪失是在人惡性腫瘤中最多見的改變。p53蛋白在進化過程中高度保寧，并在多數(shù)的正常組織中表達。已經證明野生型p53涉及細胞周期的調控(Mercer，1992)、轉錄調節(jié)(Fields?etal.，1990；Mietz?et?al.，1992)、DNA復制(Wilcock?andLane，1991；Bargonetti?et?al.，1991)和誘導編程性細胞死亡(Yonish-Rouach?et?al.，1991；Shaw?et?al.，1992)。

已經知道多種突變的p53等位基因，其中單個堿基的替換導致合成具有十分不同的生長調節(jié)特性之蛋白質，最終引起惡性腫瘤(Hollsteinet?al.，1991)。事實上，已經發(fā)現(xiàn)p53基因是常見的人類癌癥中最常見的突變基因(Hollstein?et?al.，1991；Weinberg，1991)，并且與和吸煙有關的癌癥特別相關聯(lián)(Hollstein?et?al.，1991；Zakut-Houri?et?al.，1985)。已有文獻記載了p53在乳癌中的過度表達(Casey?et?al.，1991)。

對于癌癥的基因療法的最具挑戰(zhàn)性方面之一是涉及利用腫瘤抑制基因，如p53。已有報道說明，將野生型p53轉染至某些類型的乳癌和肺癌細胞中能夠在細胞系中恢復生長抑制調控作用(Casey?etal.，1991；Takahasi?et?al.，1992)。雖然DNA轉染并不是將DNA導入病人細胞中的一種可行手段，但如果能開發(fā)傳遞p53基因的改善方法，那么上述結果就證明將野生型p53用于存在突變p53基因的癌細胞可能是一種有效的治療方法。

目前，人們正在研究和開發(fā)能夠用于腫瘤抑制之基因療法的基因傳遞系統(tǒng)。以病毒為基礎的基因轉移載體特別引人注意，這是因為病毒具有感染活細胞的效力，在這一感染過程中，病毒遺傳物質本身得以轉移。在這方面已經取得一些進展，例如，已經用遺傳工程方法生產了用于傳遞各種基因的逆轉錄病毒載體。然而，因為逆轉錄病毒的感染性取決于靶細胞上逆轉錄病毒受體的可獲得性，所以主要的問題還與用于基因療法的逆轉錄病毒載體有關，所述受體難以濃縮和純化，而且它們只能有效地整合到正在復制的細胞中。