[發明專利]狂犬病毒疫苗病毒提純方法無效
| 申請號： | 95100699.1 | 申請日： | 1995-03-25 |
| 公開（公告）號： | CN1132027A | 公開（公告）日： | 1996-10-02 |
| 發明（設計）人： | 孫富林;趙林;李愛華 | 申請（專利權）人： | 孫富林 |
| 主分類號： | A01N63/02 | 分類號： | A01N63/02 |
| 代理公司： | 中國科學院武漢專利事務所 | 代理人： | 黃文韜 |
| 地址： | 430071 湖北省武*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 狂犬病毒 疫苗 病毒 提純 方法 | ||
【權利要求書】：
一種狂犬病毒疫苗病毒提純方法，它包括毒種的選擇、檢定、毒力測定、細胞制備和細胞培養等工藝步驟，其特征是：
(1)棄細胞離心處理，將無菌的LD50達到103～104以上的狂犬病毒細胞培養液合并，以1000×g20分種離心處理，棄細胞，取狂犬病毒培養液，
(2)用醋酸調PH值，將狂犬病毒培養液的PH值調到6.7，
(3)搖勻靜止，用機械或人工方法，將調好PH值的病毒培養液搖勻，再將之放入4℃的環境中，靜止20分鐘，
(4)棄培養液離心處理，將靜止后的病毒培養液經1000×g40分鐘離心處理，取出沉淀的狂犬病毒，
(5)用Tris調PH值，在沉淀的狂犬病毒中加入EDTA溶液，使之懸浮，再用Tris將其PH值調到7.8，
(6)棄沉淀雜質離心處理，將PH值為7.8的狂犬病毒懸浮液經1000×g20分鐘離心處理，棄沉淀雜質，取上清，
(7)洗脫，將取得的上清上樣至用NT緩沖液(PH7.8)平衡好的Sephade×G75柱上，用NT緩沖液洗脫，其流速為1毫升/分，
(8)檢測與收集病毒，利用紫外分光光度計對平衡好的Sephade×G75柱上洗脫的病毒液進行檢測，收集和合并病毒峰。
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