[發明專利]富含異黃酮化合物的分離蛋白及其生產方法

無效

• 申請號: 94112830.X
• 申請日: 1994-10-12
• 公開（公告）號: CN1111946A
• 公開（公告）日: 1995-11-22
• 發明（設計）人: J·L·什恩;B·F·戈瓦拉;F·E·斯帕達弗拉
• 申請（專利權）人: 蛋白質技術國際公司
• 主分類號: A23J1/14
• 分類號: A23J1/14;A23J1/00;C07K1/14
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所
• 代理人: 董嘉揚

本發明涉及富含異黃酮的植物分離蛋白及其制備方法。

異黃酮存在于各種豆科植物中，包括植物蛋白原料如大豆。對于本發明來說，這些化合物一般包括黃豆苷、60AC-黃豆苷、黃豆苷原、染料木苷、60AC染料木苷、染料木黃酮、大豆異黃酮、生原禪寧-A、芒柄花黃素和擬雌內酯。通常這些化合物與大豆固有的苦味有關，在生產商品如分離物和濃縮物時，焦點一直集中在如何除去這些物質。例如，在傳統的生產大豆分離蛋白的方法中，用堿液介質浸取大豆片，大部分異黃酮溶解在浸出液中并在乳清中保持溶解狀態，用酸沉淀蛋白質形成分離物后乳清通常被排掉。通過徹底洗滌分離物通常可以除去殘留在酸沉淀的分離蛋白中的異黃酮。

最近人們認識到植物蛋白如大豆中所含的異黃酮能抑制人類癌細胞的生長，如在下列文獻中描述的乳腺癌細胞和前列腺細胞：Peterson和Barnes的“Genistein?Inhibition?of?the?Growth?of?Human?Breast?Cancer?Cells：Independence?from?Estrogen?Receptors?and?the?Multi-Drug?Resistance?Gene”（Biochemical?and?Biophysical?Research?Communications，Vol.179，NO.?1，P.?661-667，August?30，1991），Peterson和Barnes的“Genistein?and?Biochanin?A?Inhibit?the?Growth?of?Human?Prostrate?Cancer?Cells?but?not?Epidermal?Growth?Factor?Receptor?Tyrosine?Autophosphorylation”，（The?Prostate?22:335-345（1993））以及Barnes等人的“Soybeans?Inhibit?Mammory?Tumors?in?Models?of?Breast?Cancer”（Mutagens?and?Carcinogens?in?the?Diet?P.239-253（1990）.）。

上述令人感興趣的異黃酮引起對適合于在膳食中攝取的富含這些化合物的蛋白質物料的需求，而在以前生產商品蛋白質材料的方法中總是盡可能地除去這些化合物。

因此，本發明的目的是提供一種富含異黃酮的分離蛋白及其生產方法。此目的和其它目的在下面詳細描述的本發明中能夠實現。

本發明涉及一種富含異黃酮的植物分離蛋白及其生產方法，本發明的方法包括用PH值高于大約蛋白質等電點的含水提取劑提取植物蛋白質原料得到含有蛋白質和異黃酮的水相提取液。然后調節水相提取液的PH值至大約蛋白質材料的等電點以沉淀蛋白質材料。分離沉淀出的蛋白質材料，但避免或最大限度地減少對沉淀物的進一步的洗滌以防止失去剩余的異黃酮，提供富含異黃酮的分離物。另外，既然異黃酮容易溶解在用于溶解蛋白質的含水提取劑中，那么所采用的蛋白質原料與水的特定重量比應在提取過程中最大程度地溶解異黃酮。

對本發明來說，有用的異黃酮具有下列通式：

其中R₁、R₂、R₃和R₄可選自H、OH和OCH₃以及這些化合物的葡糖苷。具體地說，已從植物蛋白質原料分離出的這些化合物和其葡糖苷包括黃豆苷、60AC-黃豆苷、黃豆苷原、染料木苷、60AC-染料木苷、染料木黃酮、大豆異黃酮、生原禪寧-A、芒柄花黃素和擬雌內酯。本發明分離物富含的異黃酮優選包括黃豆苷、60AC-黃豆苷、黃豆苷原、染料木苷、60AC-染料木苷和染料木黃酮。

盡管本發明是針對大豆制品進行描述的，而且其方法特別適合于由大豆原料生產的富含異黃酮的分離物，但本發明方法一般也適用于從包含異黃酮的各種植物蛋白源中生產分離蛋白。

本發明的起始原料是大豆片，其中所含油已通過溶劑浸取從其中除去。用PH值大于大約蛋白質材料等電點的含水提取劑提取大豆片，優選的PH值大約為6.0-10.0，最優選的PH值大約為6.7-9.7。如果需要，可采用典型的堿性試劑來提高含水提取劑的PH值，提取劑包括氫氧化鈉，氫氧化鉀和氫氧化鈣。所需的異黃酮化合物通常溶解在含水提取劑中，為了最大程度地回收含水提取液中的這些化合物，將薄片與含水提取液的重量比控制至特定的值上以便盡可能多的溶解蛋白質材料中固有的異黃酮。