[發明專利]提取絨毛膜促性腺激素的方法

無效

• 申請號: 93101329.1
• 申請日: 1993-02-15
• 公開（公告）號: CN1084858A
• 公開（公告）日: 1994-04-06
• 發明（設計）人: 王浦林
• 申請（專利權）人: 唐山市婦幼保健院
• 主分類號: C07K3/02
• 分類號: C07K3/02;C07K15/06;C07K15/14;C07K7/10;C07G15/00
• 代理公司: 唐山專利事務所
• 代理人: 趙述之

1、一種提取絨毛膜促性腺激素的方法，其特征在于：

a、原料為人工流產血清和絨毛組織；

b、逐級層析法提取絨毛膜促性腺激素，首先用排阻層析法選出富含絨毛膜促性腺激素段的流出液，再經陽離子層析、陰離子層析、純化而制得純品。

2、根據權利要求1所述的提取絨毛膜促性腺激素的方法，其特征在于排阻層析法其分子篩材料用瓊脂糖凝膠類或葡聚糖凝膠類樹脂。

3、根據權利要求1或2所述的提取絨毛膜促性腺激素的方法，其特征在于排阻層析流動相為低濃度氧化鈉和純水交替使用，無菌血清上樣與床體積比為15-25%，用紫外監測儀收集富含絨毛膜促性腺激素的流出液。

4、根據權利要求1所述的提取絨毛膜促性腺激素的方法，其特征在于陽離子層析是把由排阻后富含絨毛膜促性腺激素的流出液用甲酸緩沖液調至PH為3.3，再通入陽離子層析柱，使PI＞3.3的雜蛋白和陽離子層柱反應，并把這部分蛋白留在柱內，流出液是富含絨毛膜促性腺激素及PI＜3.3的雜蛋白混合膠體液。

5、根據權利要求1所述的提取絨毛膜促性腺激素的方法，其特征在于陰離子層析是將從陽離子層析柱中流出的膠體液用甲酸緩沖液調至PH2.9-3.1，再通入陰離子層析柱使PH＜3.0的雜蛋白被吸附，流出液即為絨毛膜促性腺激素粗品。

6、根據權利要求1或2所述的提取絨毛膜促性腺激素的方法，其特征在于純化是將絨毛膜促性激素粗品液用堿性液調PH至7.5-8.5，擴大絨毛膜促性腺激素雜與蛋白間的靜電荷差，再通入陰離子層析柱使其與之反應，置于紫外自動監測儀上，用低鹽溶液或純水洗凈非特異吸附的蛋白，待基線平穩后用梯度洗脫液Na₂HPO₄-NaH₂PO₄-H₃PO₄系，PH為7.5-8.5設計梯度洗脫，在紫外監測儀下收集絨毛膜促性腺激素的峰段即為純品。