[發(fā)明專利]放射性標(biāo)記的抗凝血多肽

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 90108051.9
• 申請日: 1990-09-30
• 公開（公告）號: CN1050721A
• 公開（公告）日: 1991-04-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 約翰·L·卡斯特南凱;西蒙·J·T·毛
• 申請（專利權(quán)）人: 默里爾多藥物公司
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;A61K37/02;A61K49/00
• 代理公司: 中國國際貿(mào)易促進(jìn)委員會(huì)專利代理部
• 代理人: 黃革生

本發(fā)明涉及新型抗凝血多肽，它能夠被放射性標(biāo)記，可用作檢測體內(nèi)的凝血酶或作為診斷盒的適當(dāng)樣品的試劑。

抗凝血?jiǎng)┛捎米骷毙陨铎o脈血栓形成、肺栓塞、四肢末端急性動(dòng)脈栓塞、心肌梗塞及散布性血管內(nèi)凝血的藥物治療的治療劑。據(jù)信預(yù)先服用抗凝血?jiǎng)┛梢灶A(yù)防患風(fēng)濕性或動(dòng)脈硬化的心臟疾病的患者的栓塞重發(fā)，或預(yù)防某些外料手術(shù)的血栓栓塞并發(fā)癥。也已證明服用抗凝血?jiǎng)┛捎糜谥委煿跔顒?dòng)脈疾病和腦血管疾病。動(dòng)脈尤其是供應(yīng)心肌和腦的動(dòng)脈血栓形成是導(dǎo)致死亡的原因。

水蛭素為從水蛭的唾液腺分離出的65個(gè)氨基酸多肽，它是凝血酶專一性抑制劑，因此可用作抗凝血?jiǎng)１M管具有很大的潛力，但從水蛭提取物分離出的水蛭素的臨床應(yīng)用仍然是靠不住的，因?yàn)樗鼣?shù)量有限、價(jià)格昂貴、并導(dǎo)致過敏反應(yīng)（服用這種大小的任何外源蛋白質(zhì)普遍引起過敏反應(yīng)）

本申請人最早發(fā)現(xiàn)了水蛭素的一個(gè)特定區(qū)，它（至少部分）負(fù)責(zé)抗凝血活性。用化學(xué)方法合成了該肽區(qū)（水蛭素的55-65氨基酸），并顯示它與凝血酶的識別位點(diǎn)結(jié)合;該識別位點(diǎn)在空間上不同于酶切位點(diǎn)，同時(shí)也顯示合成肽的結(jié)合競爭性阻止了纖維蛋白原與凝血酶識別位點(diǎn)的結(jié)合，而后者是纖維蛋白產(chǎn)生和凝血塊形成的重要先決條件。因此該肽具有作為抗凝血?jiǎng)┑臐撛卺t(yī)學(xué)價(jià)值。

申請人現(xiàn)已制備了該肽的某些碘酪氨酸及放射性同位素標(biāo)記的酪氨酸衍生物。本發(fā)明提供了一種標(biāo)記水蛭素肽同時(shí)保持其結(jié)合位點(diǎn)活性的方法，本發(fā)明的碘酪氨酸和放射性同位素衍生物也維持了它們原來作為抗凝血?jiǎng)┑奶匦裕虼艘部沙蔀橛锌茖W(xué)價(jià)值及顯著療效的添加劑。具體地說，將氫和碘的放射性同位素加入肽中并維持該肽的生物活性的能力在抗凝血?jiǎng)┑乃幬镌囼?yàn)及使用中提供了一種新的重要的試劑。預(yù)計(jì)這種試劑在動(dòng)物及生物化學(xué)研究（即放射性免疫檢測、藥物興奮劑和拮抗劑的篩選、藥物動(dòng)力學(xué)和生物分布）和診斷成像中非常重要。而且，碘酪氨酸或其放射性同位素的存在可能證明在藥物開發(fā)及抗凝血?jiǎng)┑脑囼?yàn)中的價(jià)值，這些衍生物本身的效價(jià)可能增強(qiáng)，作用時(shí)間也可能延長。

下式所示的肽衍生物作為抗凝血?jiǎng)┛捎糜谠\斷成像、診斷檢測和“藥盒”中的定量檢測，或者作為一種抗凝血?jiǎng)⑶抑辽僖粋€(gè)取代基含有放射性同位素

X-A₁-A₂-A₃-A₄-A₅-A₆-A₇-A₈-A₉-A₁₀-Y其中X為選自氫原子、一個(gè)或兩個(gè)C_1-10烷基、一個(gè)或兩個(gè)C_2-10酰基、芐氧羰基及叔-丁氧羰基的氨基末端殘基;

A₁為水蛭素或其天然變異體的序列或其一部分、一鍵，或?yàn)楹腥魏伟被岬?-11個(gè)殘基的肽;

A₂為I-Tyr、〔³H-〕Tyr、〔¹²⁵I〕-Tyr、〔¹³¹I〕-Tyr的0-5個(gè)殘基，或者當(dāng)A₉含有一放射性標(biāo)記的氨基酸時(shí)為L-芳香族氨基酸;

A₃為Glu，A_sp，Ala;

A₄為任何氨基酸;

A₅為Ile，Val，Leu，Nle，Ald或phe;

A₆為Pro，Hyp，Azt，Pip，DhPro，噻唑烷-4-羧酸酯，Sar，NMepgl或D-Ald;

A₇為任何氨基酸;

A₈為任何氨基酸;

A₉為選自Tyr、I-Tyr、（¹³¹I〕-Tyr、〔¹²⁵I〕-Tyr、〔³H〕-Tyr、Met、Trp、Phe、Leu、Nle、Ile、Val、Cha、His、Ala和Pro的親脂性氨基酸，或者是含有這些氨基酸或任何親脂性氨基酸中至少一個(gè)的二肽;

A₁₀為水蛭素或其天然變異物的序列或其一部分、一鍵或?yàn)楹?-11個(gè)任何氨基酸殘基的肽;

Y為選自O(shè)H、（C₁-C₈）烷氧基、氨基、單或雙-（C₁-C₄）烷基取代的氨基酸的羧基末端殘基;