[發(fā)明專利]抗促卵泡激素單克隆抗體及其制備和使用

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 89100233.2
• 申請(qǐng)日: 1989-01-12
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN1035128A
• 公開(kāi)（公告）日: 1989-08-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 羅德尼·約翰·菲德斯
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 邦奇(澳大利亞)有限公司
• 主分類號(hào): C12N15/00
• 分類號(hào): C12N15/00;C12N5/00;C12P21/00;A61K37/38;A61K39/395
• 代理公司: 中國(guó)專利代理有限公司
• 代理人: 孟八一,林玉貞

1、一種抗促卵泡激素(FSH)的單克隆抗體的制備方法，該方法包括：

提供一種能產(chǎn)生抗FSH抗體的B細(xì)胞和一種骨髓瘤細(xì)胞；

使B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合；

并繁殖融合生成的雜種瘤細(xì)胞；以及

采集所述雜種瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體。

2、根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中能產(chǎn)生抗體的B細(xì)胞可從用羊促卵泡激素（oFSH）免疫的動(dòng)物或從其致免疫的組織中獲得;以及

骨髓瘤細(xì)胞系是一種NS-I型骨髓瘤細(xì)胞系。

3、根據(jù)權(quán)利要求2的方法，其中融合步驟包括在選自仙臺(tái)（Sendai）病毒和聚乙二醇的促融合劑存在下，將體細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞混合。

4、根據(jù)權(quán)利要求3的方法，其中雜種瘤細(xì)胞繁殖步驟包括：

利用放射免疫測(cè)定法和免疫組織法測(cè)定產(chǎn)生抗體的雜種瘤細(xì)胞;

接著將選擇融合的細(xì)胞雜種無(wú)性繁殖成為產(chǎn)生抗體的細(xì)胞系;以及

每個(gè)細(xì)胞系在體內(nèi)或體外繁殖。

5、產(chǎn)生抗促卵泡激素的單克隆抗體的連續(xù)細(xì)胞系包括由能產(chǎn)生抗促卵泡激素抗體的B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合而形成的雜種瘤細(xì)胞。

6、通過(guò)NS-I骨髓瘤細(xì)胞與用羊促卵泡激素免疫的BALA/C小鼠體中得到的B細(xì)胞融合，形成根據(jù)權(quán)利要求5所述的連續(xù)細(xì)胞系。

7、連續(xù)細(xì)胞系選自上述的BFR87-70和BFR87-124。

8、由產(chǎn)生抗促卵泡激素單克隆抗體的連續(xù)細(xì)胞系產(chǎn)生的抗促卵泡激素單克隆抗體包括能產(chǎn)生抗促卵泡激素抗體的B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成的雜種瘤細(xì)胞。

9、由選自上述的BFR87-70和BFR87-124連續(xù)細(xì)胞系產(chǎn)生的單克隆抗體。

10、一種純化促卵泡激素（FSH）的方法，該方法包括提供一個(gè)不純的FSH源和與一種基質(zhì)結(jié)合的抗FSH的單克隆抗體;將不純的FSH通過(guò)單克隆抗體基質(zhì)，以俘獲FSH，以及將俘獲的FSH從單克隆抗體基質(zhì)洗脫下來(lái)。

11、根據(jù)權(quán)利要求10的方法，其中促卵泡激素是一種羊促卵泡激素（oFSH）;與基質(zhì)結(jié)合的單克隆抗體選自上述的BFR87-70和BFR87-124。

12、根據(jù)權(quán)利要求11的方法，其中所述基質(zhì)是色譜凝膠，所述洗脫步驟包括用0.1M檸檬酸鹽/檸檬酸溶液分階洗脫。

13、用權(quán)利要求10的方法制備純促卵泡激素。

14、一種誘發(fā)雌性動(dòng)物動(dòng)情和/或增強(qiáng)其生殖力的方法，該方法包括給動(dòng)物施以權(quán)利要求13所述的有效量的純化促卵泡激素。

15、根據(jù)權(quán)利要求14的方法，其中處理動(dòng)物是綿羊或山羊，純FSH的給藥量約2至10iu。

16、根據(jù)權(quán)利要求15的方法，還包括在給予動(dòng)物FSH的同時(shí)或之后，再施以約0.25-1.0mg由雜種瘤細(xì)胞系生成的抗FSH的單克隆抗體。

17、根據(jù)權(quán)利要求14的方法，其中處理動(dòng)物是奶牛，施用的FSH的量約為2至20iu。

18、根據(jù)權(quán)利要求17的方法，還包括施以FSH的同時(shí)或之后，對(duì)動(dòng)物施以約1.0至3.0mg由雜種瘤細(xì)胞系生成的抗FSH的純單克隆抗體。

19、一種在雌性動(dòng)物一個(gè)動(dòng)情期內(nèi)顯著增加產(chǎn)卵數(shù)的方法，該方法包括給動(dòng)物施以根據(jù)權(quán)利要求13所述的有效量純FSH。

20、根據(jù)權(quán)利要求19的方法，其中處理動(dòng)物是綿羊或山羊，施用的FSH的量約為4至20iu。

21、根據(jù)權(quán)利要求20的方法，還包括施以FSH的同時(shí)或之后，對(duì)動(dòng)物施以約0.5至2.0mg由雜種瘤細(xì)胞系生成的抗FSH的純單克隆抗體。

22、根據(jù)權(quán)利要求19的方法，其中所述動(dòng)物是奶牛，施用的FSH的量為4至20iu。

23、根據(jù)權(quán)利要求22的方法，還包括施以FSH的同時(shí)或之后，對(duì)動(dòng)物以由雜種瘤細(xì)胞系生成的抗FSH的純單克隆抗體。

24、一種增加排卵使雌性動(dòng)物雙生的方法，該方法包括對(duì)動(dòng)物施以根據(jù)權(quán)利要求13所述的有效量純FSH。