[其他]人前脫脂蛋白A-I的表達無效
| 申請號: | 88103118 | 申請日: | 1988-05-27 |
| 公開(公告)號: | CN88103118A | 公開(公告)日: | 1988-12-14 |
| 發明(設計)人: | 波蘭·阿萊克斯;哥伯特·簡;伍爾福特·厄恩斯特 | 申請(專利權)人: | UCB公司 |
| 主分類號: | C12N15/00 | 分類號: | C12N15/00;C12N5/00;C12P21/00 |
| 代理公司: | 中國國際貿易促進委員會專利代理部 | 代理人: | 李瑛 |
| 地址: | 比利時*** | 國省代碼: | 暫無信息 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 脫脂 蛋白 表達 | ||
1、重組DNA序列,其包括為人前脫脂蛋白A-I編碼的序列,其中部分天然編碼序列被為同樣氨基酸編碼,但由不同核苷酸序列組成的DNA片段取代,從而降低或防止了發夾的形成。
2、如權利要求1所述的重組DNA序列,其中為前脫脂蛋白A-I的-6到+14氨基酸編碼的天然序列被下例順序(只表示了單鏈)取代:
5′-ATG??AGA??CAT??TTC??TGG??CAG??CAG??GAC??GAA??CCT??CCA??CAA??TCT??CCT??TGG??GAT??AGA??GTT??AAG??GAC??TTG-3′,該序列包含一個附加的ATG轉譯起始密碼子和為-6,-1,+1,+3,+4,+5,+6,+7,+10,+11和+14氨基酸殘基編碼的修飾了的密碼子。
3、可復制的克隆載體,包括權利要求1或2所述的重組DNA序列。
4、表達載體,包括連接到調節DNA序列的權利要求1或2所述的重組DNA序列,該重組序列兩側有轉譯起始和終止信號。
5、如權利要求4所述的表達載體。其中的調節DNA序列包含λ噬菌體PL啟動子區。
6、如權利要求4所述的表達載體,其中人前脫脂蛋白A-IDNA序列從下游融合到β-半乳糖苷酶DNA序列上,其中的調節DNA序列包含Lac啟動子區。
7、如權利要求4所述的表達載體,其中調節DNA序列包含酵母ARG3啟動子和轉錄終止區。
8、如權利要求4所述的表達載體,其中缺少ATG密碼子的人前脫脂蛋白A-IDNA序列從下游融合到大腸桿菌ompA蛋白信號肽的DNA序列上,而其中的調節DNA序列包含Lpp啟動子和Lac啟動子一操縱子區。
9、如權利要求4所述的表達載體,其中調節DNA序列包含棒狀病毒多配基因啟動子區。
10、選自pULB9291,pULB9292,pULB9296,pULB9299,pNIV1612和pNIV1613的重組質粒。
11、用權利要求4到9中任一項所述的表達載體轉化的細胞培養物或微生物。
12、用權利要求10所述重組質粒轉化的細胞培養物或微生物。
13、生產人前脫脂蛋白A-I的方法,包括在合適培養條件下,培養權利要求11或12所述轉化細胞或微生物,回收所生產的人前脫脂蛋白A-I。
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