[其他]促進均勻加熱自動分析器的裝置以及篩選細胞或成形體以進行表征所選特性的種群計數的方法

無效

• 申請號: 88101211
• 申請日: 1988-03-12
• 公開（公告）號: CN88101211A
• 公開（公告）日: 1988-10-05
• 發明（設計）人: 肯尼斯·H·科特里特;瓦拉斯·H·科特;卡洛斯·羅德里古茨;托馬斯·魯塞爾;羅納德·保羅
• 申請（專利權）人: 科特電子有限公司
• 主分類號: G01N33/49
• 分類號: G01N33/49;G01N33/553;G01N33/577
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利代理部
• 代理人: 鄒光新

一般說來本發明與一種自動分析器以及用這種自動分析器篩選生物細胞或成形體以進行種群計數的方法有關。這種群計數表征了一些我們選來用于研究、診斷、醫療或工業上的特性。具體些說，具體體現本發明的一些自動分析器和方法由于獨特地將電子技術和有選擇能力的生物分子（諸如抗體）的特殊性能結合在一起來對細胞和成形體進行篩選和選擇分類，就能夠對細胞和成形體實行多部分類，將細胞和成形體功能表型，以及在其它細胞中把白血病細胞、淋巴瘤細胞和硬腫瘤細胞區分出來。

采用佛洛里達，海里厄的柯爾特電子公司的A型柯爾特計數器可以成功地使自動血細胞計數器對人體外周血液進行全血細胞（CBC）常規分析達到自動化。這種儀器的電子微粒傳感系統原理在1953年10月20日頒發給瓦拉斯H。柯爾特的美國專利2，656，508中有所報道。采用只是根據這柯爾特電子傳感原理工作的微粒分析儀就能避免使用故障多、耗資大的光學傳感裝置或激光傳感裝置。

這柯爾特電子傳感原理發展推廣到諸如各種S型柯爾特計數器的更為復雜的儀器，這些儀器用專用的計算機程序使CBC參數，絕對細胞計數，血小板計數和形態，紅血細胞（RBC）形態能解釋正常的和不正常的血樣。

柯爾特電子微粒傳感原理應用了一個使用直流（DC）孔徑電源的孔徑傳感電路。這種微粒傳感器結構簡單，非常穩定可靠，美國和世界其它各地的臨床試驗室大都普遍肯定柯爾特計數器自動分析器證明了這點。這個基本的孔徑傳感電路的一個改進型在1970年頒發給瓦拉斯·柯爾特和瓦爾特·霍克的美國專利3，502，974中有所報導。除了標準的直流孔徑電源外，還加了一個高頻孔徑電流，這使敏感一個用來分類的附加參數成為可能。高頻孔徑電流產生了一個信號，這信號是血細胞內部的導電性以及細胞體積的函數。由直流孔徑電路同時產生的信號是一個通常的直流幅度信號，這個信號基本上指示了細胞的體積。高速除法電路將射頻振幅除以直流脈沖幅度，得到一個商，這個商是細胞體積和內部電阻的函數，通常稱做“濁度”。這原理在1970年也是頒發給瓦拉斯·柯爾特和瓦爾特·霍克的美國專利3，502，973中有進一步的說明。這個參數可以用于細胞分類系統。無論是一個單獨的口徑或是一對分開的孔徑都可用作這種用途。

不同種群的分類是通過檢驗所產生的一對對信號的數據來進行的。一個度量微粒體積，而另一個度量細胞內部電阻率或濁度。表示這數據的一種方便的形式是稱為散布圖的二維圖形。這類圖在梅拉美特·梅拉耐和孟德爾松主編的“流式細胞計數和分類”（約翰·威廉父子公司1979年版）第371頁中有詳細說明。

圖5A是正常血樣數據圖的一個例示。每一點代表一個單獨的細胞。離底線的高度表示這細胞的相對體積。點離右方垂直基線的距離表示相對濁度。正常白血細胞（WBC）（在去掉紅血細胞情況下）的圖呈現三個點簇，分別表示三個獨特的種群，這是因為它們的大小和內部成份有本質的不同而引起的。如果需要的話，可以用適當的電路對這些種群進行計數，得到每一種群的細胞數。依據這些固有的差別可以對細胞進行分類。

起初柯爾特電子微粒傳感原理用來對紅血細胞進行計數，而后用來確定紅血細胞的一些其它參數，這就較為復雜一些。將紅血細胞從全外周血液中除去后就可著手對白血細胞的種群進行分析，只要去除紅血細胞過程并不顯著地損害留下要測定的白血細胞種群的性質。為此開發了各種紅血細胞溶胞物，這些溶胞物雖然很有用，而且廣泛地使用著，但對于接著測定白血細胞來說并不是一切都完全令人滿意的。

上述就使用直流體積或使用各個角度光散射進行白血球流式分析的方法已經顯示出三簇白血球，分別相應于淋巴細胞，單核細胞和粒性白細胞。粒性白細胞包括嗜中性、嗜堿性和嗜酸性這三個種群。根據一些采樣能對嗜酸性種群濃度作一個粗略而有用的估計。對于這種方法第五主種群相對說來是太小了。采用專門的熒光技術也已經觀察到一簇清晰的嗜酸性種群。

這些熒光技術已用于諸如柯爾特公司的EPICS流式血細胞計數器之類的流式血細胞計數儀器。此類儀器應用了細胞在鞘流限定的一個氣柱中以排成一個單列逐個通過激光束的方式運動的原理。從細胞來的光散射信號和/或熒光信號就用來對細胞的種群進行分類。染有吸收或熒光染料的細胞使有可能對另外的細胞種群進行分類。自動多參數分析的測試方法和熒光染料的這種進展由R.C里夫等人在臨床化學（1977年卷23，1492-98頁）中作了進一步說明。這些進展將同時進行白血球種群分類數擴展為四個，即淋巴細胞，單核細胞，嗜酸性細胞和“粒性細胞”（嗜中性細胞和嗜堿性細胞）。