[其他]在大腸桿菌內表達的人類脫輔基脂蛋AI及其變異形式

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 87107991
• 申請日: 1987-10-22
• 公開（公告）號: CN87107991A
• 公開（公告）日: 1988-09-21
• 發(fā)明（設計）人: 羅蘭多·洛倫澤蒂;盧恰·莫納科;馬爾科·索里阿;拉法埃萊·帕隆巴;安東內爾·伊薩基;保羅·薩爾米恩托斯
• 申請（專利權）人: 卡洛·埃爾巴意大利農業(yè)公司
• 主分類號: C12N15/00
• 分類號: C12N15/00;C12P21/02;//;C12R119)
• 代理公司: 中國專利代理有限公司
• 代理人: 楊九昌

本發(fā)明涉及用DNA重組技術生產人類脫輔基脂蛋白AI（apoAI）及其變異型。

動脈粥樣硬化及其并發(fā)癥（即冠心病）可能是世界上最嚴重的健康問題。已發(fā)現大量與疾病發(fā)展相關的危險因素、其中最重要的是高血漿膽固醇（CHL）水平。因而，已對人體內CHL代謝的研究作了大量工作。

脂蛋白運輸系統(tǒng)把握著了解基因、飲食和激素相互作用以調節(jié)人體內血漿CHL及甘油三酯（TG）水平之機制的關鍵。血漿中脂蛋白的功能主要是將脂類由一個器官輸送到另一器官。近年已經知道，它們不僅溶解疏水脂類，而且也可指定各不同類脂質所釋放達到的身體部位。脂蛋白主要有四類：乳糜微粒（CM）、極低密度脂蛋白（VLDL）、低密度脂蛋白（LDL）和高密度脂蛋白（HDL）。

為便于在血漿中運輸，TG和膽固醇酯（LHLE）被包裹在脂蛋白顆粒中，在其中形成一個由極性磷脂（PL）的表面單層包繞的疏水核心。表面外殼還含有相對小量的未酯化CHL以及稱為脫輔基脂蛋白（apo）的蛋白質。已鑒定出至少九種apo：AⅠ、AⅡ、AⅣ、B（48-100）、CⅠ、CⅡ、CⅢ、D和E。

特別引人關注的是有關血漿脂蛋白水平與冠血病（CHD）發(fā)展的危險性之間關系的研究。HDL和LDL均為CHL和CHLH的載體，但已證明LDL-CHL水平是正危險因素（Kannel等，Ann.Intern.Med.，90：85-91，1979），而HDL則是重要的負危險因子（Yaari等，Lancet，1：1011-1015，1981）。雖然有關這些脂蛋白的確切功能及作用方式尚不完全明瞭，但顯然HDL可通過稱為反向CHL運輸（RCT）的機制特定地用于由外周組織中除去CHL并將其回輸到肝臟內。

HDL的主要脫輔基脂蛋白是apoAⅠ，一些研究表明，血漿apoAⅠ水平與CHD之間反相關相似于文獻中提到的HDL-CHL水平與CHD之間的反相關（Iskikawa等，Eur.J.Clin.Invest.，8：172-182，1978）。此外，HDL-CHL和apoAⅠ水平與血管造影可證明的冠狀動脈硬化損害的嚴重程度反相關（Pearson等，Amer.J.Epidem.，109：285-295，1979;Maciejko等，New????Eng.J.Med.，309：385-389，1983）。由此可以認為，血漿中高濃度HDL影響CHD是通過延遲動脈粥樣硬化形成和/或促進已有損傷的消退得以證實的。

HDL脫輔基脂蛋白（主要是apoAⅠ）與卵磷脂的復合物在體外促進游離CHL由細胞（包括培養(yǎng)的動脈平滑肌細胞）內流出（Stein等，Biochem.Biophys.Acta，380：106-118，1975）。給帶有實驗性動脈粥樣硬化的動物靜脈內灌注磷脂，可有利地影響這種流出過程（Adams等，J.Path.Bact.，94：77-87，1968），并使apoAⅠ/卵磷脂復合物以相似于天然HDL顆粒的速率由血漿中排除（Malmendier等，Clin.Chem.Acta，131：201-210，1983）。

給飼以CHL的兔靜脈內輸注apoAⅠ可使動脈損傷的面積減少50%。這表明apoAⅠ具有防止動脈硬化性損傷形成的作用，且可能是通過增加動脈壁對CHL的攝入達到的（Maclejko和Mao，Artheriosclerosis，2：407a，1982;Mao等，Fed.Proc.（USA），42，no7 pABSTRACT357，1983;Badimon等，Cardiovascular Disease¹86，1986ABSTRACT81）。