[其他]在大腸桿菌內表達的人類脫輔基脂蛋AI及其變異形式

無效

• 申請號: 87107991
• 申請日: 1987-10-22
• 公開（公告）號: CN87107991A
• 公開（公告）日: 1988-09-21
• 發明（設計）人: 羅蘭多·洛倫澤蒂;盧恰·莫納科;馬爾科·索里阿;拉法埃萊·帕隆巴;安東內爾·伊薩基;保羅·薩爾米恩托斯
• 申請（專利權）人: 卡洛·埃爾巴意大利農業公司
• 主分類號: C12N15/00
• 分類號: C12N15/00;C12P21/02;//;C12R119)
• 代理公司: 中國專利代理有限公司
• 代理人: 楊九昌

1、能夠在已轉化的宿主內表達蛋白質的表達載體，所說的蛋白質能夠使用抗人apoAI抗血清以ELISA法檢測，并且具有下列式(1)的結構通式

Met-X-Y??(1)

其中X是鍵、包括得自β半乳糖苷酶N末端氨基酸殘基之序列或包括蛋白A的一個或多個IgG結合區域之序列的載體肽序列、或人apoAI的前導序列；且y代表人apoAI或其遺傳變異型的序列。

2、根據權利要求1的表達載體，其中所說的蛋白質是Met-apoAⅠ、Met-apoAⅠ-T6、Met-apoAⅠ-MⅠ或Met-apoAⅠ-T6/MⅠ。

3、根據權利要求2的表達載體，其得自于質粒pFCE4+。

4、根據權利要求3的表達載體，其為質粒pML11-20、pIL8-6、pIL8-Ⅰ或pIL8-6Ⅰ。

5、根據權利要求1的表達載體，其中載體肽序列包括一得自β半乳糖苷酶的多至前15個N末端氨基酸殘基的序列。

6、根據權利要求5的表達載體，其中載體肽包括序列Thr-Met-Ile-Thr-Pro-Ser-Phe-Asp-Gly-Ser-Met或Thr-Met-Ile-Thr-Asn-Ser-Arg-Gly-Ser-Met。

7、根據權利要求6的表達載體，其得自于質粒pUC8或pUC9。

8、根據權利要求7的表達載體，其為質粒pIPI、pIPI-6、pIPI-Ⅰ、pIPI-6Ⅰ、pRP5、pRP5-6、pRP5-Ⅰ或pRP5-6Ⅰ。

9、根據權利要求1的表達載體，其中載體肽包括葡萄球菌蛋白A或其殘基23至270。

10、根據權利要求1的表達載體，其中載體肽序列包括蛋白A的一個或多個IgG結合區域，所說的結合區域是通過蛋白水解酶的識別序列與人apoAⅠ或其遺傳變異型相融合的。

11、根據權利要求10的表達載體，其中載體肽是由（λ噬菌體之CRO蛋白的前11個氨基酸）-（葡萄球菌蛋白A的248個氨基酸（殘基23至270））-（Pro-Gly-Asp-Ser-Thr）-（β半乳糖苷酶的后17個氨基酸）-（含有蛋白水解酶腸激酶之識別序列的17個氨基酸即Gly-Asp-Pro-Glu-Phe-Val-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys-Ser-Ser-Arg-Gly-Ser-Met）所組成的。

12、根據權利要求1的表達載體，其中載體肽序列包括蛋白A的一個或多個IgG結合區域，而且它是自質粒pLM3衍生得到的。

13、根據權利要求12的表達載體，其為質粒pLM8。

14、根據權利要求1的表達載體，其中人apoAⅠ的前導序列是與人apoAⅠ或其遺傳變異型的序列融合的，并且是由質粒pDS20衍生得到的。

15、根據權利要求14的表達載體，其為質粒pFC33。

16、已用上述權利要求之任一項中所限定的表達載體轉化的宿主，并從而能夠在其中表達如權利要求1中所限定的式（1）的蛋白質。

17、根據權利要求16的宿主，其中宿主是大腸桿菌的菌株。

18、生產能夠使用抗人apoAⅠ抗血清以ELISA法檢測的蛋白質的方法，該方法包括培養如權利要求16或17中限定的已經轉化的宿主并回收如此得到的所說的蛋白質。