[其他]人紅血球生成素基因在穩定轉染的哺乳動物細胞中的高水平表達

無效

• 申請號: 87104424
• 申請日: 1987-06-26
• 公開（公告）號: CN87104424A
• 公開（公告）日: 1988-04-27
• 發明（設計）人: 杰里·S·鮑威爾
• 申請（專利權）人: 華盛頓大學評議會
• 主分類號: C12N15/00
• 分類號: C12N15/00;C12P12/00
• 代理公司: 中國專利代理有限公司
• 代理人: 林玉貞

1、主要包含相當于人紅血球生成素基因的ApaI限制片段的基本純的DNA或RNA。

2、權利要求1中的DNA或RNA，其ApaⅠ限制片段主要包含如圖1所示的意義鏈的核苷酸序列，或其互補的RNA序列。

3、權利要求1中的DNA或RNA序列，它們有效地與能夠使其表達的第二核酸序列相連接。

4、權利要求3的DNA或RNA，其中第二核酸序列由下列中選擇一種或數種：啟動子序列、增強子序列、多聚腺苷酸序列、選擇性標記序列、質粒、病毒或逆病毒表達載體、以及逆病毒的跨染色體作用因子。

5、含有權利要求3的DNA或RNA的細胞。

6、用權利要求3的DNA或RNA穩定轉染的細胞。

7、權利要求6的細胞，它們從包括真核細胞、酵母和細菌的一組中選出。

8、權利要求7的細胞，其中真核細胞來源于腎臟。

9、權利要求8的細胞，其中腎臟細胞是上皮細胞。

10、一種表達有生物活力的重組人紅血球生成素的方法，包括用主要含有人紅血球生成素基因的ApaⅠ限制片段的DNA、RNA或核苷酸序列轉染宿主細胞，使轉染細胞與培養基相接觸，使細胞表達紅血球生成素，并回收表達的紅血球生成素。

11、權利要求10的方法，其中ApaⅠ限制片段攜帶在質粒或病毒上。

12、權利要求10的方法，其中宿主細胞系從包括真核細胞、酵母和細菌的一組中選出。

13、一種通過與保溫的培養基接觸的細胞系表達有生物活力的重組人紅血球生成素的方法，做出的改進包括在所說的方法中加入能在保溫培養基中產生紅血球生成素的細胞系，所說的細胞系通過用主要含有人紅血球生成素基因的ApaⅠ限制片段的DNA、RNA或核苷酸序列轉染宿主細胞系產生。

14、按照權利要求13的在與保溫培養基接觸的細胞系中表達有生物活力的重組人紅血球生成素的方法，其中所說的細胞系能夠使每升保溫的培養基中有至少二百萬單位的紅血球生成素的名義產量。

15、權利要求13的方法，其中ApaⅠ限制片段為質粒所攜帶。

16、權利要求13的方法，其中ApaⅠ限制片段為病毒所攜帶。

17、權利要求13的方法，其中宿主細胞系從包括真核細胞、酵母和細菌的一組中選出。

18、通過權利要求5，6，7，8或9中的細胞所表達的人紅血球生成素。

19、通過權利要求10，11，12，13，14，15，16或17中的宿主細胞系所表達的人的紅血球生成素。

20、通過重組DNA方法生產的有生物活力的人紅血球生成素。