[其他]肽定序的方法

無效

• 申請號: 87100897
• 申請日: 1987-02-20
• 公開（公告）號: CN87100897A
• 公開（公告）日: 1987-11-11
• 發明（設計）人: 馬克·L·斯托洛維茲
• 申請（專利權）人: 分析化學國際有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 中國專利代理有限公司
• 代理人: 楊九昌,曹恒興

1、測定一種多肽末端氨基酸種類的一種方法，包括：

b)將所說的末端氨基酸與在所說的試劑上的所說的c部份偶合；

c)除去過量的試劑；

d)從剩余的上述多肽上裂解出上述試劑-末端氨基酸復合物；

e)將剩余的上述多肽與上述試劑-末端氨基酸分離；

f)將上述試劑末端氨基酸復合物轉化成一種穩定的化合物；并且

g)鑒定此轉化了的末端氨基酸。

2、權利要求1的方法還包括重復進行權利要求1的步驟，對從上述f步驟中獲得的上述剩余的多肽，進行多肽或蛋白質的定序，從而鑒定每一個循環的剩余的多肽的末端氨基酸。

3、權利要求1的方法，其中的步驟c還包括：

（ⅰ）將步驟b的反應混合物與一種具有下列化學式的清除劑分子進行反應：

H₂N-〔〕-SH，式中〔〕是一個烷基、芳基或全鹵化了的烷基或芳基，反應是在有利于上述NH₂部份與上述過量的試劑的上述c部分之間發生反應的條件下進行;

（ⅱ）將步驟（ⅰ）的產品與固定化的有機汞制劑混合，以便結合過量的清除劑分子與清除劑分子-試劑復合物;及

（ⅲ）除去未固定的試劑-多肽復合物。

4、權利要求3的方法，其中清除劑是選自含有H₂N-苯基-SH，H₂N-苯基-CH₂-SH，H₂N-CH₂-CH₂-SH，及其全鹵化衍生物的化合物組。

5、權利要求4的方法，其中所說的清除劑是（甲巰基）苯胺。

6、權利要求3的方法，其中所說的固定化的有機汞制劑包括鍵合到一種固定化的硅膠上的苯基汞氫氧化物。

7、權利要求1的方法，其中步驟e還包括將步驟d的反應混合物與一種固定化硼酸混合，并除去未固定化的物質。

8、權利要求7的方法，其中所說的固定化硼酸是將苯基硼酸鍵合到硅膠上。

9、權利要求8的方法，其中所說的步驟e（ⅲ）包括用含水酸處理上述的固定化硼酸，以從其中除下所說的試劑-氨基酸復合物。

10、權利要求3，4，5，及6的方法，其中將上述的有機汞制劑基質放置在一條柱中。

11、權利要求7，8及9的方法，其中上述固定化的硼酸是被放置在一條柱中。

12、測定一種多肽的N-末端氨基酸種類的一種方法，包括：

a）獲得2，3-二羥基馬來酰亞氨-4′-異氰酸苯酯（DHMPITC）;

b）將上述多肽的末端氨基酸偶合到上述的DHMPITC上;

c）將（甲巰基）苯胺加到步驟b所說的反應混合物中;

d）在含有N-苯基硼酸-N′-丙基正硅烷基脲（PBA）的柱上洗提上述步驟c的反應混合物;

e）在無水酸的條件下裂解步驟d的洗提液;

f）將步驟e的反應混合物加到含有N-苯基硼酸-N′-丙基正硅烷基脲（PBA）的柱上;

g）在含水酸的條件下，將由步驟f得到的固定化產物從PBA柱上洗脫;

h）將從步驟g所得的洗脫液轉化成穩定的苯基乙內酰硫脲氨基酸衍生物;以及

i）鑒定步驟h的產物。