[其他]鹿茸組織細胞培養方法無效
| 申請號: | 86107913 | 申請日: | 1986-11-20 |
| 公開(公告)號: | CN1003177B | 公開(公告)日: | 1989-02-01 |
| 發明(設計)人: | 高云;吳玉林;王斌;李春義;程利平;趙世珍 | 申請(專利權)人: | 高云 |
| 主分類號: | C12N5/02 | 分類號: | C12N5/02 |
| 代理公司: | 農牧漁業部專利事務所 | 代理人: | 劉軍,陳如明 |
| 地址: | 吉林省左*** | 國省代碼: | 吉林;22 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 鹿茸 組織 細胞培養 方法 | ||
1、一種鹿茸組織細胞的培養方法,其特征在于所采用的培養液配方為,(1)1%MEM液69-96%、雙抗1%、小牛血清3-30%、PH值6.8-7.3,(2)1%MEM液69-96%、雙抗1%、鹿血清3-30%、PH值6.8-7.3;選擇未分化的間充質或者前成軟骨細胞,經過細胞分散處理,接入培養液(1)或(2)中,細碎粒與培養液比例為1∶50(g/ml),鹿茸細胞懸液與培養液比例為1∶25(ml/ml),置于培養瓶,在36-38℃條件下,培養14-21天,成為試管型鹿茸細胞。
2、根據權利要求1所述的培養方法,其特征在于細胞分散處理是將采取的增生帶組織細胞,用兩把尖刃刀,在滴有血清的玻片上,對刃分割鹿茸組織,直到不能分割的細碎粒為止,或者將鹿茸組織塊放入搗碎機內,加1%MEM液,其鹿茸組織塊與1%MEM液比例為1∶3,開機3-5分鐘,經數次搗細成細胞懸液。
3、根據權利要求1所述的培養方法,其特征在于培養液1的配方為1%MEM液74%、雙抗1%、小牛血清25%,PH值為7.0-7.2。
4、根據權利要求1所述的培養方法,其特征在于培養液2的配方為:1%MEM液74%、雙抗1%、鹿血清25%,PH值為7.0-7.2。
5、根據權利要求1所述的培養方法,其特征在于細胞傳代培養,先傾出原培養液,用無鈣、鎂去離子液(FCE)洗數次,加ATV消化,再加培養液1或者培養液2,進行分瓶培養。
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