[其他]利用負股核糖核酸引起植物體細胞的變化

無效

• 申請號: 86107039
• 申請日: 1986-10-16
• 公開（公告）號: CN86107039A
• 公開（公告）日: 1987-04-15
• 發明（設計）人: 弗朗西斯·麥克科米科;肯尼思·A·巴頓;威廉·F·史惠恩
• 申請（專利權）人: 阿格拉塞特斯
• 主分類號: C12N15/00
• 分類號: C12N15/00;C12N5/00
• 代理公司: 上海專利事務所
• 代理人: 全永留,夏曉

1、一種引起高等植物體細胞變化的方法，本發明的特征在于所述的方法包括下述步驟；

將一段能導致與靶RNA充分互補的負股RNA的轉錄的DNA順序導入植物，以使負股RNA有效地結合到靶RNA股以抑制體內靶RNA股的活性。

2、如權利要求1所述的方法，其特征在于所述的靶RNA股為信使RNA，內源性蛋白的表達活性被抑制。

3、如權利要求1所述的方法，其特征在于所述的靶RNA股至少是病原體RNA的一部分。

4、如權利要求3所述的方法，其特征在于所述的靶RNA股是煙草花葉病毒的RNA。

5、如權利要求1所述的方法，其特征在于所述的將DNA順序導入植物的步驟包括下述步驟;

在細菌中組建一個表達載體質粒，包括一個通常能用于植物細胞的啟動區及一段至少部分編碼位于啟動區3′的靶DNA的DNA順序，DNA順序的取向與啟動區的正常閱讀方向相反;

用來自表達載體質粒的表達載體轉化培養的植物細胞，使得轉化了的植物細胞轉錄負RNA股，并且

使轉化植物細胞再生，形成整株植物。

6、如權利要求5所述的方法，其特征在于所述的轉化步驟包括下述步驟：

用表達載體宿主與A.tumefaciens結合;

選擇A.tumefaciens轉結合體;并用選擇的A.tumefaciens感染植物細胞。

7、一種正常形態的植物，特征在于所述的植物的細胞的基因組含有一段嵌合DNA順序，該嵌合DNA順序可導致與靶RNA股充分互補的負RNA股的轉錄，因而負RNA股將專門與靶RNA股聯合從而抑制植物細胞中靶RNA股的活性。

8、如權利要求7所述的植物，其特征在于所述的靶RNA股為一段信使RNA，并且抑制的是植物細胞中內源性基因的表達活性。

9、如權利要求7所述的植物，其特征在于所述的靶RNA股至少為病毒RNA的一部分。

10、如權利要求7所述的植物，其特征在于所述的植物細胞中的嵌合DNA順序包括：

一個通常可用于植物細胞的啟動區;及一段位于啟動區的3′處的DNA編碼順序，至少為靶DNA股的一部分編碼DNA順序，其定位與啟動區正常閱讀方向相反。

11、如權利要求10所述的植物，特征在于所述的嵌合DNA順序還包括一段可用于植物的、位于轉錄順序3′處的聚腺苷酸順序。

12、權利要求7所述一種植物所產生的種子。

13、權利要求8所述的植物所產生的種子。

14、權利要求9所述的植物所產生的種子。

15、一個可用于植物的嵌合基因的組建過程，其特征在于，所述的組建過程包括：

一般可用于植物細胞的啟動區順序;及

一段位于啟動區3′處的DNA編碼順序，至少為植物細胞中有正常活性的靶RNA股的一部分編碼，DNA編碼順序的取向與啟動區正常轉錄方向相反，而使嵌合基因致導至少與靶RNA鏈部分互補的負股RNA的轉錄，從而抑制植物體內靶RNA股的活性。

16、如權利要求15所述的嵌合基因，其特征在于所述的嵌合基因還包括一段一般可用于植物的位于DNA編碼順序的3′處的聚腺苷酸順序。