[其他]穩定的r-干擾素的配制方法

無效

• 申請號: 86101878
• 申請日: 1986-03-24
• 公開（公告）號: CN86101878A
• 公開（公告）日: 1986-10-29
• 發明（設計）人: 扎卡里·嚴;伊姆蒂亞茲·阿馬德·喬德里
• 申請（專利權）人: 先靈公司
• 主分類號: A61K45/02
• 分類號: A61K45/02;//;31195;31375;3170;3119)
• 代理公司: 中國專利代理有限公司
• 代理人: 巫肖南

本發明是關于穩定的冷凍干燥的γ-干擾素的配制方法。依此法配制的γ-干擾素，在水中恢復后，室溫下，至少可在24小時內保持清亮及生物活性。

“γ-干擾素”（GIF）一詞是指天然干擾素或重組體干擾素，它與人的免疫干擾素具有相類似的生物特性。在本專利公開時，術語γ-干擾素-A或GIF-A代表含有以半胱氨酸-酪氨酸-半胱氨酸開頭，以谷氨酰胺結尾的146個氨基酸。另外，已知幾種截斷的γ-干擾素產物，在下文中對其中每一個都用類似的方法來標明，即，在γ-干擾素（GIF）一詞之后加英文大寫字母。如：GIF-D，代表消除半胱氨酸-酪氨酸-半胱氨酸片段后的產物，它僅含143個氨基酸;又如：GIF-B，是指GIF-A在羧基位置被截斷后，含有131個氨基酸的片段。所有這些截斷產物均可用于本專利。而GIF-A則是在本項發明中優先選用的一種GIF。

據報道，γ-干擾素為一種抗增殖劑，并能增強α-和β-干擾素（即白細胞和成纖維細胞干擾素）的抗病毒及抗增殖效力。還有人提出，γ-干擾素可作為免疫調節劑。

一種已有的干擾素劑量形式的配制方法，是將與其它組分和在一起的干擾素冷凍干燥，以便在使用時用水恢復。由于從文獻上得知，γ-干擾素在酸中不穩定（不象α-和β-干擾素那樣，在酸性P^H條件下是穩定的），因而通常在中性或微堿性條件下對其進行處理。例如，英國專利申請GB2119313A公開，在P^H7.5時，冷凍干燥的配方為每毫升恢復溶液中含7至23毫克毫升γ-干擾素。然而，當γ-干擾素濃度較高時（每毫升中含量高于0.2毫克），因為立即生成可見的沉淀，這種中性或微堿溶液是不能作為注射用配方的。由于幾方面的原因，這些沉淀是不合乎要求的，例如，有使病人患血栓癥的潛在危險，有使γ-干擾素的效力喪失的跡象，及堵塞注射器針頭的可能性。

而本發明提供了一個生物穩定的冷凍干燥γ-干擾素的配方，包括γ-干擾素和-相應的緩沖劑，其中緩沖劑可維持水恢復液的P^H值在4.0到6.0的范圍內，最佳為P^H4.5-5.0，該溶液的濃度為每毫升含0.001，最好是0.05，到10毫克γ-干擾素。

這種配方令人吃驚地形成了生物及化學穩定的冷凍干燥粉末，該粉末用水恢復時形成清亮的溶液。

因γ-干擾素最好是非腸道施用，故本發明的配方主要供注射用，即，肌肉、靜脈及皮下注射。當然，本配方也將適用γ-干擾素的其它方法，其中γ-干擾素需要采取一種更為合適的劑量形式（例如，鼻腔噴霧劑，及象眼藥水那樣的局部劑量形式）。

有關γ-干擾素的酸不穩定性已有大量文獻記載。例如，J.Vilcek等，Journal of Immunological Methods，第69卷（1984年），61-70頁，報道了γ-干擾素在低P^H時的不穩定性，他們發現在P^H3.5時，分離柱中洗提出了大部分γ-干擾素，但提出組分必須是立即直接收集到中性緩沖介質中。

在低P^H條件下，含有或不含如人血清白蛋白那樣的酸性蛋白質增溶劑的γ-干擾素溶液，在初期是清亮的，這與中性或微堿性溶液不同，它們是混濁液。在酸性P^H下，最終總是要生成沉淀，但增溶劑的加入可大大延緩沉淀的生成。

本發明中的冷凍干燥粉，可在P^H4.5時，經長期冷藏后（如一年）仍保持其穩定性，恢復液保持清亮，也就是無沉淀和/或混濁，并在室溫或冷藏下至少24小時內具有生物穩定性。由于藥粉是在臨使用前恢復，因而要使溶液保持清亮以便注射，24小時是足夠長的。此外，恢復液在冷凍貯存2星期后，仍可保持清亮及生物穩定性。

在本發明的文字敘述中，“生物穩定”一詞是指當用標準方法通過病毒的細胞病變效應（CPE）的延緩來度量時，干擾素配方的生物活性在上述的貯藏期內基本保持不變。另一些不太定量的生物功能，如抗增殖及免疫調節活性，也都顯示了同樣的穩定性。

本發明的一個突出的優點是，在較低P^H下，γ-干擾素更易溶解，因而與以前公布的中性或堿性配方相比，本配方可使γ-干擾素的濃度提高。中性P^H下，含量大于0.2毫克γ-干擾素/毫升的溶液將產生沉淀，而在本發明的配方中，清亮的恢復溶液中所含γ-干擾素可高達10毫克/毫升。