[其他]促生長素的溶解和復(fù)性方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 86100915
• 申請日: 1986-02-21
• 公開（公告）號: CN86100915A
• 公開（公告）日: 1986-08-20
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 拉里·安德魯·本特爾;詹姆斯·威廉·米切爾;斯蒂芬·布雷德利·斯托爾斯;格蘭特·強島本
• 申請（專利權(quán)）人: 孟山都公司
• 主分類號: C12N15/00
• 分類號: C12N15/00;C12N1/38
• 代理公司: 中國專利代理有限公司
• 代理人: 羅宏

1、一種從宿主細胞的折射體內(nèi)溶解得到促生長素蛋白并使之復(fù)性的方法，其特征在于，宿主細胞含所指的蛋白質(zhì)，該蛋白質(zhì)參與構(gòu)成與其接觸的所謂折射體，將折射體與一有效劑量和濃度的尿素或二甲砜的水溶液混合，并處于有效的PH條件下，就可完成對折射體的溶解，爾后，將含有所說蛋白質(zhì)的溶液與一溫和氧化試劑接觸充分的時間，以使存在于所說蛋白質(zhì)分子中的半胱氨酸殘基形成分子內(nèi)的二硫鍵。

2、一種將促生長素蛋白從一種含有該蛋白質(zhì)的宿主細胞的折射體中溶出的方法，包括采用有效劑量和濃度的尿素或二甲砜，在有效PH水平與折射體接觸而實現(xiàn)的對該蛋白的溶解。

3、在權(quán)利要求2的方法中，折射體是被溶解于尿素的水溶液中。

4、在權(quán)利要求3的方法中，溶解過程是在一種低于25℃、高于溶液冰點的溫度中進行。

5、在權(quán)利要求3的方法中，溶解是在PH大于9以上進行。

6、權(quán)利要求3的方法中，溶解在PH大致為9到12之間進行。

7、在權(quán)利要求3的方法中，溶解是在PH大致為9到12之間，同時溫度約為4℃時進行。

8、在權(quán)利要求3的方法中，宿主細胞是細菌大腸桿菌Escher-ichia??CoLi的一個株系。

9、在權(quán)利要求3的方法中，溶解是在不用還原劑的情況下進行。

10、在權(quán)利要求3的方法中，溶解是在還原劑參與下進行。

11、在權(quán)利要求3的方法中，促生長素是牛促生長素或豬促生長素。

12、在權(quán)利要求11的方法中，宿主細胞是菌種Escherich-ia??CoLi的一個株系。

13、在權(quán)利要求12的方法中，尿素濃度在約1摩爾到10摩爾之間，PH維持在約9到12之間，溫度在溶液的冰點之上，25℃以下。

14、權(quán)利要求13的方法中，PH值用有效劑量的三羥甲基氨甲烷來維持在所說的PH范圍內(nèi)。

15、使促生長素蛋白復(fù)性的方法中，促生長素蛋白與尿素或二甲砜試劑接觸，同時還要與溫和氧化試劑接觸一段時間，足以使其所含的半胱氨酸殘基形成分子內(nèi)的二硫鍵。

16、權(quán)利要求15的方法中，促生長素蛋白在尿素的水溶液中復(fù)性。

17、權(quán)利要求16的方法中，復(fù)性是在濃度為3到5摩爾的尿素中進行的。

18、權(quán)利要求16的方法中，復(fù)性是在PH大于9以上時進行的。

19、權(quán)利要求16的方法中，復(fù)性在PH大致為9到12時進行。

20、權(quán)利要求16的方法中，復(fù)性在溫度高于溶劑冰點，低于25℃時進行。

21、權(quán)利要求16的方法中，復(fù)性過程中有還原劑參與。

22、權(quán)利要求16的方法中，復(fù)性過程中無還原劑的參與。

23、權(quán)利要求11的方法中，生長激素是牛或豬的生長激素。

24、權(quán)利要求23的方法中，復(fù)性是在濃度約為2和5摩爾的尿素中進行;溫度高于溶液冰點，低于25℃左右;PH大致在9至12之間。

25、權(quán)利要求2的方法中，折射體是溶解在二甲砜水溶液里。

26、權(quán)利要求15的方法中，促生長素蛋白的復(fù)性在二甲砜的水溶液中進行。