[其他]克隆編碼具有人粒性巨噬細胞和嗜伊紅細胞生長因子活性多肽的cDNA無效
| 申請號: | 85109132 | 申請日: | 1985-11-18 |
| 公開(公告)號: | CN85109132A | 公開(公告)日: | 1986-12-03 |
| 發明(設計)人: | 模田崇;弗蘭克·唐·李;唐娜·梅·倫尼克;新井賢一 | 申請(專利權)人: | 先靈生物技術公司 |
| 主分類號: | C12N15/00 | 分類號: | C12N15/00;C12P21/02;A61K37/02;// |
| 代理公司: | 中國專利代理有限公司 | 代理人: | 劉元金,羅宏 |
| 地址: | 美國加利福尼亞州*** | 國省代碼: | 暫無信息 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 克隆 編碼 有人 巨噬細胞 伊紅 細胞 生長因子 活性 多肽 cdna | ||
1、產生一種具有刺激人粒性細胞/巨噬細胞群落活性因子多肽的過程,所述過程其特征是由下列步驟組成:
a)形成一種由編碼所敘多肽核苷酸序列組成的載體,其核苷酸序列能夠通過包含有載體的宿主進行表達,
b)載體進入宿主,和
c)在適于核苷酸序列表達成為所述多肽的條件下,維持含有載體的宿主。
2、根據權利要求1所述,其中核苷酸序列來源于一種編碼所敘多肽mRNA序列的cDNA序列。
3、根據權利要求1或權利要求2所述,其中宿主是一種由載體轉化或轉染的哺乳動物細胞。
4、根據權利要求1-3任何一項所述,其中多肽是糖基化的。
5、根據權利要求1-4任何一項所述,其中載體是由與第二種核苷酸序列相連的編碼所敘多肽核苷酸所組成,第二種核苷酸序列包括有促進編碼所敘多肽核苷酸序列表達的一個啟動子序列。
6、根據權利要求5所述,第二種核苷酸序列包括一個SV40病毒早期區啟動子和一個SV40病毒晚期區多聚腺苷酸酰化作用序列。
7、根據權利要求1-6任何一項所述,其中編碼所敘多肽的核苷酸序列也編碼具有嗜伊紅細胞生長因子活性的一種多肽。
8、根據權利要求1-7其中任何一項所述,編碼所敘多肽的核苷酸序列實際上具有圖1所示的序列。
9、根據權利要求1,其中編碼所敘多肽的核苷酸序列是不同的,但來源于人細胞并且能夠同圖1所示核苷酸序列進行雜交。
10、根據權利要求9,其中核苷酸序列包括編碼多肽一個信息區的至少一部分。
11、多肽至少一部分實際上其特征是由圖1所示氨基酸序列所構成,并且對人嗜中性粒細胞,巨噬細胞以及嗜伊紅細胞具有群落刺激因子活性。
12、根據權利要求11所述,多肽設有一個信號序列。
13、根據權利要求11所述,多肽是十分純的,完全沒有來自其他哺乳動物造血細胞的蛋白質。
14、其特征是編碼至少一部分多肽的核酸序列具有對人粒性細胞/巨噬細胞的刺激因子活性,并且能夠同編碼其他哺乳動物細胞生長因子的第二種核酸序列進行雜交。
15、根據權利要求14所述核酸序列是編碼至少一部分圖1所示多肽的一種DNA序列。
16、編碼多肽一部分的核酸序列對人中性粒性細胞,巨噬細胞和嗜伊紅細胞具有群落刺激因子活性,并且能夠同編碼多肽的第二種核酸序列雜交。
17、一種載體實際上是由權利要求16所述的DNA序列所構成。
18、當所述載體進入微生物體或細胞時,復制載體能夠表達權利要求16的DNA序列。
19、根據權利要求18所述利用復制表達載體較化或較染微生物或細胞。
20、增加細胞生長或分化其特征是,包括要使細胞同具有圖1所示氨基酸序列作為主要部分的多肽接觸。
21、根據權利要求20,促進了細胞在體外的生長。
22、根據權利要求20,其中細胞是粒性細胞或巨噬細胞。
23、為了在一種液體培養基中制備對進行培養的人中性粒細胞,巨噬細胞和嗜伊紅細胞具有群落刺激因子活性的多肽,可以由以圖1所示cDNA序列作為主要組成部分的載體對一種原核微生物或真核細胞進行轉染或轉化。
24、轉化生物或細胞其特征是至少含有一種基因或編碼一種或多種具有人粒性細胞/巨噬細胞群落刺激活性多肽的另外的DNA序列的一部分。
25、具有人粒性細胞/巨噬細胞群落刺激因子活性的蛋白質是由權利要求24所述培養的生物體或細胞所產生的。
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