[其他]生產(chǎn)高增溶蛋白的方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 85101554
• 申請(qǐng)日: 1985-04-01
• 公開（公告）號(hào): CN85101554A
• 公開（公告）日: 1986-07-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 奈良潔;本多進(jìn)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 武田藥品工業(yè)株式會(huì)社
• 主分類號(hào): C07K15/26
• 分類號(hào): C07K15/26;C12N15/00
• 代理公司: 中國專利代理有限公司
• 代理人: 陶令靄

1、為生產(chǎn)高濃度人體r-干擾素水溶液，并使之就地老化并濃縮。本法包括從含蛋白變性劑的人體r-干擾素的稀水溶液中提取蛋白變性劑的方法。

2、按照權(quán)利要求1的方法，在高濃度人體γ-干擾素水溶液中的人體γ-干擾素為非共價(jià)的二聚物。

3、按照權(quán)利要求1的方法，所得人體γ-干擾素為重組體的人體γ-干擾素。

4、按照權(quán)利要求1的方法，所得人體γ-干擾素是由圖5所示的146個(gè)氨基酸組成的一種多肽。

5、按照權(quán)利要求1的方法，所得人體γ-干擾素是脫（C²_ys-T²_yr-C³_ys）γ-干擾素。

6、按照權(quán)利要求1的方法，含蛋白變性劑的人體γ-干擾素的稀水溶液是在還原性硫化合物和蛋白變性劑與含有蛋白變性劑的緩沖溶液存在下，把粗的人體γ-干擾素加以凝膠過濾而得到的稀洗出液。

7、按照權(quán)利要求1的方法，稀水溶液中的人體γ-干擾素的濃度為30-200微克/毫升。

8、按照權(quán)利要求1的方法，該蛋白變性劑是胍鹽。

9、按照權(quán)利要求1的方法，該胍鹽是鹽酸胍。

10、按照權(quán)利要求1的方法，該人體γ-干擾素的稀水溶液含有濃度為0.1至7摩爾的蛋白變性劑。

11、按照權(quán)利要求1的方法，把含有蛋白變性劑的人體γ-干擾素稀水溶液加以凝膠過濾而分離。

12、按照權(quán)利要求11的方法，該凝膠是由葡聚糖凝膠聚丙烯酰胺和瓊脂糖凝膠組成的一組中選出的一員。

13、按照權(quán)利要求11的方法，該凝膠為葡聚糖凝膠。

14、按照權(quán)利要求11的方法，把人體γ-干擾素稀水溶液裝進(jìn)用凝膠填充的柱中進(jìn)行凝膠過濾，然后以緩沖溶液提取γ-干擾素。

15、按照權(quán)利要求14的方法，該緩沖溶液的PH為5.0至8.0。

16、按照權(quán)利要求14的方法，該緩沖溶液中含有一種還原性硫的化合物。

17、按照權(quán)利要求14的方法，以0.1至10的空速進(jìn)行提取。

18、按照權(quán)利要求1的方法，在溫度0°至40℃下使溶液就地老化0.5至7天。

19、按照權(quán)利要求18的方法，在溫度35°至40℃下使溶液就地老化24至72小時(shí)。

20、按照權(quán)利要求1的方法，以超過濾進(jìn)行老化溶液的濃縮。

21、γ-干擾素水溶液中含有人體γ-干擾素的非共價(jià)二聚物。

22、按照權(quán)利要求21的水溶液，其中人體γ-干擾素為圖5所示的146個(gè)氨基酸組成的多肽。

23、按照權(quán)利要求22的水溶液，其中人體γ-干擾素的表觀分子量，在沒有十二烷基硫酸鈉存在下在凝膠過濾中大約為40，000，在十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠塊電泳中和在十二烷基硫酸鈉存在下凝膠過濾中大約為18，000。

24、按照權(quán)利要求21的水溶液，其中人體γ-干擾素為脫（C¹_ys-T²_yr-C³_ys）γ-干擾素。

25、按照權(quán)利要求24的水溶液，其中人體γ-干擾素的表觀分子量，在沒有十二烷基硫酸鈉存在下在凝膠過濾中大約為35，000，在十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠塊電泳中大約為17，000。