[發(fā)明專利]RO8191和/或AS2863619在促進紅系祖細胞或紅系前體細胞分化增殖中的應用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202310907811.9 | 申請日: | 2023-07-24 |
| 公開(公告)號: | CN116622631B | 公開(公告)日: | 2023-10-13 |
| 發(fā)明(設計)人: | 杜如龍;于蕾;武雪寧;黃雯靜;張成志;郜華磊;吳理達;顧雨春 | 申請(專利權)人: | 呈諾再生醫(yī)學科技(北京)有限公司 |
| 主分類號: | C12N5/078 | 分類號: | C12N5/078;C12N5/0789 |
| 代理公司: | 北京預立生科知識產(chǎn)權代理有限公司 11736 | 代理人: | 朱萍 |
| 地址: | 102600 北京市大興區(qū)經(jīng)*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | ro8191 as2863619 促進 紅系祖 細胞 紅系前 體細胞 分化 增殖 中的 應用 | ||
1.RO8191和/或AS2863619在促進紅系祖細胞或紅系前體細胞分化增殖中的應用。
2.一種用于促進造血干細胞或造血祖細胞誘導分化為紅系祖細胞或紅系前體細胞的基礎培養(yǎng)基,其特征在于,所述基礎培養(yǎng)基包含RO8191和/或AS2863619。
3.根據(jù)權利要求2所述的基礎培養(yǎng)基,其特征在于,所述基礎培養(yǎng)基中還包含IMDM培養(yǎng)基、ITS-X、抗壞血酸、乙酰半胱氨酸、奎諾二甲基丙烯酸酯、BSA。
4.根據(jù)權利要求3所述的基礎培養(yǎng)基,其特征在于,所述基礎培養(yǎng)基中各組分的含量分別為:5?μM?RO8191、1?μM?AS2863619、1%?ITS-X、50?μg/mL抗壞血酸、50?μM乙酰半胱氨酸、50?μM奎諾二甲基丙烯酸酯、0.5%?BSA。
5.一種促進造血干細胞或造血祖細胞誘導分化為紅系祖細胞或紅系前體細胞的培養(yǎng)體系,其特征在于,所述培養(yǎng)體系包括紅細胞特化階段培養(yǎng)基、紅細胞擴增階段培養(yǎng)基、紅細胞成熟階段培養(yǎng)基;
所述紅細胞特化階段培養(yǎng)基包含權利要求2-4中任一項所述的基礎培養(yǎng)基、SCF、IL-3、EPO、地塞米松;
所述紅細胞擴增階段培養(yǎng)基包含權利要求2-4中任一項所述的基礎培養(yǎng)基、SCF、IL-3、EPO、地塞米松;
所述紅細胞成熟階段培養(yǎng)基包含權利要求2-4中任一項所述的基礎培養(yǎng)基、SCF、EPO。
6.根據(jù)權利要求5所述的培養(yǎng)體系,其特征在于,所述紅細胞特化階段培養(yǎng)基中各組分的含量分別為:50?ng/mL?SCF、10?ng/mL?IL-3、10?ng/mL?EPO、1?μM地塞米松;
所述紅細胞擴增階段培養(yǎng)基中各組分的含量分別為:50?ng/mL?SCF、10?ng/mL?IL-3、10?ng/mL?EPO、1?μM地塞米松;
所述紅細胞成熟階段培養(yǎng)基中各組分的含量分別為:50?ng/mL?SCF、10?ng/mL?EPO。
7.一種促進造血干細胞或造血祖細胞誘導分化為紅系祖細胞或紅系前體細胞的方法,其特征在于,所述方法包括采用權利要求5或6所述的培養(yǎng)體系對造血干細胞或造血祖細胞進行培養(yǎng)。
8.根據(jù)權利要求7所述的方法,其特征在于,所述方法包括如下步驟:
(1)?Day0-6,紅細胞特化階段,采用權利要求5或6中所述的紅細胞特化階段培養(yǎng)基培養(yǎng)造血干細胞或造血祖細胞;
(2)?Day6-12,紅細胞擴增階段,采用權利要求5或6中所述的紅細胞擴增階段培養(yǎng)基培養(yǎng)步驟(1)得到的細胞;
(3)?Day12-15,紅細胞成熟階段,采用權利要求5或6中所述的紅細胞成熟階段培養(yǎng)基培養(yǎng)步驟(2)得到的細胞,獲得紅系祖細胞或紅系前體細胞。
9.根據(jù)權利要求8所述的方法,其特征在于,在Day0-3、Day0-6、Day0-9、Day0-12或Day0-15期間所使用的培養(yǎng)基中含有RO8191和AS2863619。
10.根據(jù)權利要求8所述的方法,其特征在于,步驟(1)中細胞密度為1×105個/mL;
步驟(2)中細胞密度為5×105個/mL;
步驟(3)中細胞密度為1×106個/mL。
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