[發明專利]一株谷氨酸棒桿菌及其在發酵生產L-亮氨酸中的應用

有效

• 申請號: 202310849084.5
• 申請日: 2023-07-12
• 公開（公告）號: CN116590202B
• 公開（公告）日: 2023-09-12
• 發明（設計）人: 張天惕;周旭波;唐海靜;馬淑芳;高建國
• 申請（專利權）人: 歐銘莊生物科技（天津）有限公司濱海新區分公司;歐尚元智能裝備有限公司;歐銘莊生物科技（天津）有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C07C227/40;C07C227/42;C07C229/08;C12P13/06;C12R1/01
• 代理公司: 北京君以信知識產權代理有限公司 11789
• 代理人: 符彥慈

1.一株谷氨酸棒桿菌，其特征在于：所述谷氨酸棒桿菌為谷氨酸棒桿菌（Corynebacterium?glutamicum）cglzh1007，該谷氨酸棒桿菌cglzh1007保藏于中國普通微生物菌種保藏管理中心（CGMCC），保藏日期為2022年8月1日，保藏地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號，菌種保藏編號為CGMCC?No.25470。

2.根據權利要求1所述的谷氨酸棒桿菌的應用，其特征在于：采用谷氨酸棒桿菌cglzh1007發酵生產L-亮氨酸。

3.根據權利要求2所述的谷氨酸棒桿菌的應用，其特征在于：采用谷氨酸棒桿菌cglzh1007發酵生產L-亮氨酸，包括如下步驟：

將保藏的谷氨酸棒桿菌cglzh1007活化至固體斜面培養基，32℃培養24h，將活化后的斜面菌種接種于搖瓶液體培養基中，置于搖床32℃培養，將培養至對數期的搖瓶菌種接種于種子培養基內進行種子培養，培養至對數生長期接種于發酵培養基中發酵培養，發酵液提取純化后獲得L-亮氨酸晶體。

4.根據權利要求3所述的谷氨酸棒桿菌的應用，其特征在于：所述發酵液提取純化的具體步驟如下：

（1）膜過濾：將含有L-亮氨酸的發酵液經過陶瓷膜過濾，去除菌體，得到含有L-亮氨酸的過濾清液；

（2）離子交換：將含有L-亮氨酸的過濾清液上離子交換柱進行離子交換，使用氨水洗脫收集L-亮氨酸富集液；

（3）濃縮結晶：將L-亮氨酸富集液進行蒸發濃縮結晶，得到含有L-亮氨酸晶體的晶漿；

（4）離心分離：將含有L-亮氨酸晶體的晶漿通過離心機進行離心分離，去除晶漿中的母液，得到L-亮氨酸濕晶體；

（5）干燥：將L-亮氨酸濕晶體進行干燥得到L-亮氨酸產品。

5.根據權利要求3所述的谷氨酸棒桿菌的應用，其特征在于：斜面培養基包括葡萄糖1~2?g/L、蛋白胨10~15?g/L、牛肉膏10~15?g/L、酵母膏5~10?g/L、磷酸二氫鉀1~5?g/L、硫酸鎂0.1~3?g/L、氯化鈉2.5~5?g/L、瓊脂粉15~25?g/L。

6.根據權利要求3所述的谷氨酸棒桿菌的應用，其特征在于：搖瓶液體培養基包括葡萄糖30~50?g/L、尿素1~5?g/L、磷酸二氫鉀1~2?g/L、硫酸鎂0.1~5?g/L、多肽粉20~50?g/L、酵母浸粉5~10?g/L。

7.根據權利要求3所述的谷氨酸棒桿菌的應用，其特征在于：種子培養基包括葡萄糖30~50?g/L、硫酸銨5~20?g/L、尿素1~5?g/L、磷酸二氫鉀1~3?g/L、硫酸鎂0.2~2?g/L、多肽粉30~50?g/L、酵母浸粉5~10?g/L。

8.根據權利要求3所述的谷氨酸棒桿菌的應用，其特征在于：發酵培養基為葡萄糖90~130?g/L、硫酸銨15~30?g/L、醋酸銨10~15?g/L、磷酸二氫鉀1~5?g/L、硫酸鎂0.1~1?g/L、多肽粉30~50?g/L、玉米漿干粉10~50?g/L。

9.根據權利要求7所述的谷氨酸棒桿菌的應用，其特征在于：種子培養控制條件為溫度32℃、pH7.0、罐壓0.05Mpa、溶氧30~40%。

10.根據權利要求8所述的谷氨酸棒桿菌的應用，其特征在于：發酵培養控制條件為溫度32℃、pH7.0、罐壓0.05Mpa、溶氧20~40%，發酵過程中通過補糖控制發酵液中殘糖含量在10~15g/L。