[發(fā)明專利]評(píng)估與蛋白偶聯(lián)的核酸穩(wěn)定性的方法及試劑盒

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202310655716.4
• 申請(qǐng)日: 2023-06-05
• 公開（公告）號(hào): CN116381125A
• 公開（公告）日: 2023-07-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 吳昊
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 迦進(jìn)生物醫(yī)藥（上海）有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/96
• 分類號(hào): G01N30/96;G01N33/68
• 代理公司: 廣東普潤(rùn)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 44804
• 代理人: 寇闖

1.一種對(duì)與蛋白偶聯(lián)的核酸穩(wěn)定性進(jìn)行分析的方法，所述方法包括：

a)?將目標(biāo)核酸偶聯(lián)物與血漿混勻；

b)?使用結(jié)合目標(biāo)核酸偶聯(lián)物中的蛋白的免疫球蛋白或抗體對(duì)純化載體進(jìn)行包被；

c)?將包被后的純化載體與待測(cè)樣品進(jìn)行共孵育，獲得結(jié)合有待測(cè)樣品的純化載體；

d)?通過離子交換色譜對(duì)目標(biāo)待測(cè)樣品進(jìn)行分離，并通過每個(gè)峰的保留時(shí)間以及260nm和280?nm的相對(duì)吸收比值，對(duì)目標(biāo)待測(cè)樣品穩(wěn)定性進(jìn)行分析。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述核酸為天然或在特定位置經(jīng)過化學(xué)修飾的、長(zhǎng)度10-200?nt的單鏈或者雙鏈寡聚核苷酸。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述核酸為天然或經(jīng)修飾的RNA序列。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述目標(biāo)核酸偶聯(lián)物中的蛋白為單克隆抗體、雙特異性抗體、多特異性抗體、抗體片段、具有特定組織靶向性的長(zhǎng)度不少于10個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)、環(huán)狀或線性的多肽。

5.一種用于實(shí)施根據(jù)權(quán)利要求1至4中任一項(xiàng)所述的方法的試劑盒，所述試劑盒包括：1)純化載體、2)結(jié)合目標(biāo)核酸偶聯(lián)物中的蛋白的免疫球蛋白、3)封閉緩沖液、4)清洗緩沖液、5)洗脫緩沖液、6)中和緩沖液、以及7)制劑緩沖液。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的試劑盒，其特征在于，所述純化載體是包被有鏈霉親和素的磁珠、包被有Protein?A/G的瓊脂糖微球、或者含有NHS酯配基的聚合物微球。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的試劑盒，其特征在于，所述結(jié)合目標(biāo)核酸偶聯(lián)物中的蛋白的免疫球蛋白是單克隆抗體、多克隆抗體或抗體片段。

8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的試劑盒，其特征在于，所述封閉緩沖液是含有離子和蛋白的中性緩沖液。

9.根據(jù)權(quán)利要求5所述的試劑盒，其特征在于，所述清洗緩沖液是含有離子和表面活性劑的中性緩沖液。

10.根據(jù)權(quán)利要求5所述的試劑盒，其特征在于，所述洗脫緩沖液是有生物相容性的酸性緩沖液；所述中和緩沖液是堿性緩沖液；所述制劑緩沖液是含有離子的弱酸性緩沖液。