[發明專利]一種基于生物傳感器的快速檢測沙門氏菌的方法

在審

• 申請號: 202310619455.0
• 申請日: 2023-05-30
• 公開（公告）號: CN116482360A
• 公開（公告）日: 2023-07-25
• 發明（設計）人: 褚海培;陳瑞愛;冼美添;徐飛;李佳慧;韓銀;馮海霞;陳思璇
• 申請（專利權）人: 華南農業大學
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/58;G01N33/543;G01N21/64
• 代理公司: 麗水創智果專利代理事務所(普通合伙) 33278
• 代理人: 楊文

1.一種基于生物傳感器的快速檢測沙門氏菌的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)將待檢測牛奶高速離心后，去除上層脂肪和下層沉淀，并調節牛奶的pH值，將處理后的牛奶作為待檢測樣品；

(2)將生物傳感器與待檢測樣品進行混合，捕獲待檢測樣品中可能存在的沙門氏菌；

(3)將步驟(2)中可能捕獲了沙門氏菌的生物傳感器與液體培養基混合，并將得到的混合物置于能使沙門氏菌增殖的條件下進行培養；

(4)將步驟(3)得到的培養物吸入無菌注射器中，利用超濾膜過濾后，利用PBS進行多次洗滌，洗滌后的剩余物在355納米紫外燈照射下觀察是否有熒光，有熒光則說明有沙門氏菌，沒有熒光則沒有沙門氏菌。

2.根據權利要求1所述的基于生物傳感器的快速檢測沙門氏菌的方法，其特征在于，步驟(1)中，所述高速離心的轉速為12500-13000r/min，所述高速離心的時間為10-12min；所述去除上層脂肪和下層沉淀的步驟中，采用超濾膜，所述超濾膜的膜孔徑為0.25-0.3μm。

3.根據權利要求1所述的基于生物傳感器的快速檢測沙門氏菌的方法，其特征在于，步驟(1)中，所述調節牛奶的pH值的步驟中，采用Tris-HCl溶液，調節pH值為7.7。

4.根據權利要求1所述的基于生物傳感器的快速檢測沙門氏菌的方法，其特征在于，步驟(2)中，所述生物傳感器為免疫磁珠，所述免疫磁珠由谷胱甘肽修飾的CdTe量子點、沙門氏菌抗體與磁珠偶聯而成。

5.根據權利要求4所述的基于生物傳感器的快速檢測沙門氏菌的方法，其特征在于，步驟(2)中，所述混合的溫度為35-38℃，所述混合的時間為25-35min。

6.根據權利要求1所述的基于生物傳感器的快速檢測沙門氏菌的方法，其特征在于，步驟(3)中，所述增殖的條件為溫度32-37℃、pH為7-7.5。

7.根據權利要求1所述的基于生物傳感器的快速檢測沙門氏菌的方法，其特征在于，步驟(4)中，所述利用PBS進行多次洗滌，具體包括以下步驟：另取注射器，吸入濃度為5-6g/L、pH＝7.5的PBS溶液洗滌3-5次，再用含有吐溫-20的濃度為5-6g/L、pH＝7.5的PBS溶液洗滌3-5次，所述吐溫-20的體積百分比為0.05％。