[發明專利]一種紅花荷的組織培養方法

在審

• 申請號: 202310590401.6
• 申請日: 2023-05-24
• 公開（公告）號: CN116616177A
• 公開（公告）日: 2023-08-22
• 發明（設計）人: 周衛榮;周衛信;嚴萍;周建榮;倪尉廷
• 申請（專利權）人: 德興市榮興苗木有限責任公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 嘉興恒冠知識產權代理事務所(普通合伙) 33488
• 代理人: 朱琴琴

本發明公開了一種紅花荷組織培養方法，步驟包括紅花荷外植體的前處理、紅花荷外植體的采取、紅花荷外植體的消毒、紅花荷外植體的誘導培養、紅花荷芽的增殖培養、紅花荷芽的壯苗培養、紅花荷苗的生根培養。本發明全程采用基本配方為WPM的低氮培養基培養，添加蘋果酸、酪氨酸、葉酸等形成不同的培養基配方，以滿足不同階段苗木對營養的需求，減少了紅花荷玻璃化現象；采用母本遮光處理的方式，極大提高了紅花荷的誘導成活率，可以在短時間內得到更多的紅花荷苗，滿足了園林公司對于一些特殊變異新品種在母本數量較少的情況下，需要大規模商業生產的需求。

技術領域

本發明涉及植物繁殖技術領域，具體而言涉及一種紅花荷的組織培養方法。

背景技術

在植物繁殖技術領域，組織培養是植物的人工營養繁殖方法之一。紅花荷(學名：RhodoleiachampioniiHook.f.)：金縷梅科紅花荷屬常綠喬木，高可達12米，紅花荷多被廣泛種植作觀賞用途。紅花荷的花形像吊鐘，而且體積頗大，所以又名“吊鐘王”。但紅花荷結實少，繁育困難，而且難以規模化的保持優良性狀繁育。因此，開發一種紅花荷組培苗快速繁育方法顯得很有必要。

現有技術中，申請號為CN201610166219.8的發明專利中公開了一種紅花荷組培苗快速繁育方法，種子經催芽播種后，在幼苗期間選育，以幼苗的頂芽為外植體，通過外植體消毒、誘導培養、叢生芽增殖、不定根發生、煉苗移栽等過程獲得了紅花荷離體再植株，建立紅花荷組織培養快速繁殖技術體系，可以保持紅花荷母本的優良性狀，有利于紅花荷優良無性系苗木的規模化生產。該方法采用在幼苗期間選育，并以幼苗的頂芽為外植體，建立了紅花荷的組織培養快速繁殖技術體系。然而，上述組織培養方法的培育過程比較復雜，培育周期長，在生根培養以后還需要進行煉苗移栽操作，增加了工作量；組織培養過程中，外植體在誘導階段和生根階段都比較容易出現褐化死亡，現有技術中均沒有采用相應的減少或者預防褐化的措施；此外，紅花荷容易出現的玻璃化現象也需要進一步控制。

發明內容

針對現有技術的不足，本發明的目的在于提供一種紅花荷的組織培養方法，通過采用低氮培養基培養，減少紅花荷玻璃化現象，添加酪氨酸和有機物形成不同的培養基配方，以滿足不同階段苗木對營養的需求；通過采用母本遮光處理的方式，極大提高了紅花荷的誘導成活率，可以在短時間內得到更多的紅花荷苗。

本發明解決技術問題所采用的技術方案是：一種紅花荷的組織培養方法，所述培養方法包括，紅花荷外植體的前處理、紅花荷外植體的采取、紅花荷外植體的消毒、紅花荷外植體的誘導培養、紅花荷芽的增殖培養、紅花荷芽的壯苗培養以及紅花荷苗的生根培養；

其中，所述前處理包括選取紅花荷高50～80cm中等大小的無病無蟲害的盆栽嫁接苗，將盆栽苗搬入溫室大棚遮光50％處理一個月；促使盆栽苗長出嫩芽枝條，在此期間只澆水不施肥，從盆栽苗基部澆水，避免水落到新長出嫩芽枝條上增加組培污染率；一個月之后進行采集，將采集好的紅花荷外植體進行消毒；消毒完成后進行誘導培養；

所述誘導培養基由WPM+酪氨酸100mg/L+葉酸2ml/L+6-BA?1～3mg/L+NAA0.1mg/L+糖20g/L+瓊脂5.5g/L+蘋果酸1ml/L組成，pH調至5.6～5.8，每瓶接種一個外植體；所述增殖培養的培養基由WPM+葉酸2mL/L+酪氨酸100mg/L+6-BA?0.5～1.5mg/L+NAA0.1mg/L+糖20g/L+瓊脂5.5g/L+蘋果酸1mL/L組成，pH調至5.6～5.8；所述壯苗培養的培養基由WPM+酪氨酸100mg/L+葉酸2mL/L+NAA?0～0.3mg/L+糖20g/L+瓊脂6g/L+蘋果酸1mL/L組成，pH調至5.6～5.8；所述生根培養的培養基由1/2WPM+葉酸2ml/L+IBA0.3mg/L+糖20g/L+瓊脂6g/L+蘋果酸1mL/L組成，pH調至5.6～5.8。