[發明專利]一種轉化合成酪醇的苯丙酮酸脫羧酶突變體及其應用在審
| 申請號： | 202310575370.7 | 申請日： | 2023-05-22 |
| 公開（公告）號： | CN116622688A | 公開（公告）日： | 2023-08-22 |
| 發明（設計）人： | 夏媛媛;齊麗娜;是徐蕾;陳獻忠;楊海泉;沈微 | 申請（專利權）人： | 江南大學 |
| 主分類號： | C12N9/88 | 分類號： | C12N9/88;C12N15/60;C12N15/70;C12N1/21;C12P7/22;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211 | 代理人： | 仇鈺瑩 |
| 地址： | 214000 江蘇*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 轉化 合成 丙酮酸 脫羧酶 突變體 及其 應用 | ||
1.一種高活性苯丙酮酸脫羧酶突變體，其特征在于，在氨基酸序列如SEQ?ID?NO.5所示的親本酶ARO10的基礎上，進行了如下任一種突變：
(1)將第331位的天冬氨酸突變為絲氨酸；
(2)將第331位的天冬氨酸突變為纈氨酸；
(3)將第331位的天冬氨酸突變為半胱氨酸。
2.編碼權利要求1所述苯丙酮酸脫羧酶突變體的基因。
3.攜帶權利要求2所述基因的重組載體。
4.表達權利要求1所述的苯丙酮酸脫羧酶突變體，或含有權利要求2所述基因，或含有權利要求3所述重組載體的重組微生物細胞。
5.如權利要求4所述的重組微生物細胞，其特征在于，所述微生物細胞為細菌細胞或者真菌細胞。
6.一種重組大腸桿菌，其特征在于，表達了權利要求1所述的苯丙酮酸脫羧酶突變體。
7.根據權利要求6所述的重組大腸桿菌，其特征在于，以大腸桿菌BL21(DE3)、大腸桿菌MG1655或大腸桿菌CCTCC?NO：M2019390為宿主細胞；以pEtac或pkk223-3為表達載體。
8.一種生產酪醇的方法，其特征在于，將權利要求6所述的重組大腸桿菌在含有葡萄糖的培養基中發酵。
9.如權利要求7所述的方法，其特征在于，所述發酵是在M9Y液體培養基中，于28～32℃發酵至少48h。
10.權利要求1所述的苯丙酮酸脫羧酶突變體，或權利要求6所述的重組大腸桿菌，或權利要求8～9任一所述方法在制備酪醇及含有酪醇的產品中的應用。
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