[發明專利]一種增強免疫原性的碘標記納米抗體制備方法和應用在審
| 申請號： | 202310521529.7 | 申請日： | 2023-05-10 |
| 公開（公告）號： | CN116462759A | 公開（公告）日： | 2023-07-21 |
| 發明（設計）人： | 余飛;朱夢琴;張佳佳;楊夢蝶;張升虹;張瀟藝 | 申請（專利權）人： | 上海市第十人民醫院 |
| 主分類號： | C07K16/28 | 分類號： | C07K16/28;C07K1/13;A61K51/10;A61P35/00;A61K101/02 |
| 代理公司： | 安徽致至知識產權代理事務所(普通合伙) 34221 | 代理人： | 許朋波 |
| 地址： | 200072 *** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 增強 免疫原性 標記 納米 抗體 制備 方法 應用 | ||
1.一種增強免疫原性的碘標記納米抗體制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
步驟S1：將Na131I和Nb109混合：取10?μL濃度為10?mg/mL的Nb109溶液,加入1-2?mCiNa131I，渦旋振蕩混合反應1分鐘；
步驟S2：加入氯胺T溶液進行氧化反應：在步驟S1溶液中加入15?μL濃度為2?mg/mL氯胺T溶液，渦旋振蕩混合反應，靜置3分鐘；
步驟S3：加入焦亞硫酸鈉溶液終止反應：在步驟S2溶液中加入20?μL濃度為2?mg/mL焦亞硫酸鈉溶液，渦旋振蕩混合反應1分鐘；
步驟S4：產物經PD-10純化柱進行純化：將產物用PBS經PD-10純化柱淋洗，得到131I-Nb109；
步驟S5：對步驟S4得到的131I-Nb109采用紙層析法進行標記率和放射化學純度測定，同時，采用SDS-PAGE法檢測蛋白純度和分子量。
2.根據權利要求1所述的一種增強免疫原性的碘標記納米抗體制備方法，其特征在于，所述步驟S5中紙層析法進行標記率和放射化學純度測定，為取1μL標記物點至裁剪后的新華一號紙原點處，放至75%丙酮展開劑，上升至目標位置后取出晾干，依據公式計算得出標記率和化學純度。
3.根據權利要求1所述的一種增強免疫原性的碘標記納米抗體制備方法，其特征在于，所述步驟S5中SDS-PAGE法檢測蛋白純度和分子量，為將變性后的樣品，加入至15%?凝膠后電泳，以考馬斯亮藍染色后拍照以檢測蛋白純度和分子量。
4.一種通過權利要求1所述的制備方法制備的放射性碘標記納米抗體，其特征在于，應用于非小細胞肺癌治療效果評估和增強免疫原性分析。
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