[發明專利]林蛙特異性序列、引物及利用其鑒定林蛙或林蛙油的方法

在審

• 申請號: 202310474484.2
• 申請日: 2023-04-27
• 公開（公告）號: CN116497131A
• 公開（公告）日: 2023-07-28
• 發明（設計）人: 彭英華;郭佳;陳澤;龐鑫;孫澤鵬
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院特產研究所
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12Q1/686;C12N15/11
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211
• 代理人: 鄧宇

1.一種林蛙特異性序列COI，其特征在于，所述林蛙特異性序列COI的核苷酸序列如SEQID?NO.1所示。

2.權利要求1所述林蛙特異性序列COI在鑒定林蛙中的應用。

3.權利要求1所述林蛙特異性序列COI在鑒定林蛙油中的應用。

4.一種用于擴增權利要求1所述林蛙特異性序列COI中部分片段的引物對，其特征在于，所述引物對的上游引物核苷酸序列如SEQ?ID?NO.2所示，下游引物核苷酸序列如SEQ?IDNO.3所示。

5.權利要求4所述引物對在鑒定林蛙中的應用。

6.權利要求4所述引物對在鑒定林蛙油中的應用。

7.一種利用PCR鑒定林蛙的方法，其特征在于，所述方法為提取蛙油DNA，以蛙油DNA為模板，進行PCR擴增，若PCR結果顯示240bp處具有明亮的單一條帶，則判斷樣本為林蛙；所述PCR擴增所用引物對的上游引物核苷酸序列如SEQ?ID?NO.2所示，下游引物核苷酸序列如SEQ?ID?NO.3所示。

8.一種利用PCR鑒定林蛙油的方法，其特征在于，所述方法為提取蛙油DNA，以蛙油DNA為模板，進行PCR擴增，若PCR結果顯示240bp處具有明亮的單一條帶，則判斷樣本為林蛙油；所述PCR擴增所用引物對的上游引物核苷酸序列如SEQ?ID?NO.2所示，下游引物核苷酸序列如SEQ?ID?NO.3所示。

9.根據權利要求7或8任意一項所述的方法，其特征在于，所述PCR擴增的體系為2×EsTaqMasterMix10.0μL，上下游引物各1μL，DNA模板4μL，ddH₂O4μL。

10.根據權利要求7或8任意一項所述的方法，其特征在于，所述PCR擴增的程序為94℃預變性2min；94℃變性30s，60℃退火30s，72℃延伸30s，30個循環；72℃2min。