[發明專利]一種人TGM3乙酰化多肽、抗原、抗體及其制備方法和應用在審
| 申請號： | 202310469590.1 | 申請日： | 2023-04-26 |
| 公開（公告）號： | CN116515786A | 公開（公告）日： | 2023-08-01 |
| 發明（設計）人： | 黃國良;王寧;李文凱;汪婧;曹慧媛 | 申請（專利權）人： | 廣東醫科大學 |
| 主分類號： | C12N9/10 | 分類號： | C12N9/10;C07K19/00;C07K16/06;C07K16/40;G01N33/574;G01N33/573;G01N33/569 |
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| 地址： | 524002 *** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 tgm3 乙酰化 多肽 抗原 抗體 及其 制備 方法 應用 | ||
1.一種人TGM3乙酰化多肽，其特征在于，所述人TGM3乙酰化多肽的序列為DVTDKYK(acetyl)YPEGSDC，其中acetyl表示乙酰化。
2.一種抗原，其特征在于，所述抗原為權利要求1的人TGM3乙酰化多肽和載體蛋白的偶聯物。
3.根據權利要求2所述的抗原，其特征在于，所述載體蛋白選自KLH、OVA、THY或BSA。
4.一種抗體，其特征在于，所述抗體可特異性結合權利要求1所述的人TGM3乙酰化多肽。
5.根據權利要求4所述的抗體，其特征在于，所述抗體選自多克隆抗體或其經過化學手段或酶消化處理后可仍然保持結合所述人TGM3乙酰化多肽的性質的抗體片段。
6.根據權利要求5所述的抗體，其特征在于，所述多克隆抗體為利用DVTDKYK(acetyl)YPEGSDC和載體蛋白的偶聯物免疫非人動物接著純化提取所述非人動物的血清后獲得的。
7.根據權利要求4-6任一項所述的抗體，其特征在于，所述抗體可用于人TGM3蛋白K441乙酰化位點的乙酰化水平檢測。
8.權利要求4-7任一項所述的抗體的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
(1)人工合成權利要求1所述的人TGM3乙酰化多肽；
(2)將合成的多肽與載體蛋白偶聯，將偶聯產物進行脫鹽柱純化后免疫非人動物；
(3)經過四次免疫的非人動物血清對抗體效價進行檢測，收集免疫非人動物血清，并純化抗體；
(4)對純化后抗體進行檢測。
9.權利要求1所述的人乙酰化TGM3多肽或權利要求2-3任一項所述的抗原或權利要求4-7任一項所述的抗體在制備用于癌細胞檢測的試劑或試劑盒中的應用。
10.一種檢測試劑盒，其特征在于，包括權利要求4-7任一項所述的抗體、抗原修復液、PBS緩沖溶液、酶阻斷劑、辣根酶標羊抗小鼠/兔IgG聚合物、DAB顯色劑、蘇木素染液、乙醇、環保透明劑、0.5％氨水和超純水。
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