[發(fā)明專利]一種胰腺癌類器官、培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202310468573.6
• 申請日: 2023-04-26
• 公開（公告）號: CN116555181A
• 公開（公告）日: 2023-08-08
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 廖傳榮;朱宇;蘭堅強(qiáng);黃敏
• 申請（專利權(quán)）人: 創(chuàng)芯國際生物科技（廣州）有限公司
• 主分類號: C12N5/09
• 分類號: C12N5/09;C12N5/071
• 代理公司: 廣州容大知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 44326
• 代理人: 溫純

本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種胰腺癌類器官、培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法。胰腺癌類器官培養(yǎng)基，其特征在于，包括基礎(chǔ)培養(yǎng)和特異性添加因子，特異性添加因子包括如下終濃度的組分：B27，1?5×；EGF，10?100ng/ml；Noggin，20?500ng/ml；R?spondin?1，100?1000ng/ml；Wnt3a，50?500ng/ml；Igf?2，10?100ng/ml；SB?505124，1?10μM；SB?203580，1?10μM；Y?33075，1?100nM。本發(fā)明提供的胰腺癌類器官培養(yǎng)基含有胰腺癌類器官培養(yǎng)所需的最少組分，組分不需要細(xì)胞培養(yǎng)中最常見的組分牛血清白蛋白，節(jié)約成本的同時降低了FBS中帶來的細(xì)胞毒性和抑制物；本發(fā)明提供的胰腺癌類器官培養(yǎng)基適合胰腺癌類器官的培養(yǎng)，類器官培養(yǎng)基的各個組分產(chǎn)生協(xié)同作用，使培養(yǎng)得到的胰腺癌類器官維持了原發(fā)組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)和基因特征。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種胰腺癌類器官、培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法。

背景技術(shù)

胰腺癌是一組主要起源于胰腺導(dǎo)管上皮及腺泡細(xì)胞的惡性腫瘤，惡性程度極高，起病隱匿，早期診斷難，進(jìn)展迅速，生存時間短，是預(yù)后最差的惡性腫瘤之一，被稱為“癌中之王”，其發(fā)病率和死亡率都高居全球和我國惡性腫瘤的前十位。近年來，胰腺癌的發(fā)病率在國內(nèi)外均呈明顯的上升趨勢。2021年統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示，在美國所有惡性腫瘤中，胰腺癌新發(fā)病例男性位列第10位，女性第9位，占惡性腫瘤相關(guān)死亡率的第4位。中國國家癌癥中心2021年統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示，胰腺癌位居我國男性惡性腫瘤發(fā)病率的第7位，女性第11位，占惡性腫瘤相關(guān)死亡率的第6位。胰腺癌的發(fā)生發(fā)展機(jī)制錯綜復(fù)雜，目前尚不十分清楚胰腺癌的病因，其發(fā)生或與吸煙、飲酒、高脂肪和高蛋白飲食、過量飲用咖啡、環(huán)境污染及遺傳等因素有關(guān)。近年來的調(diào)查報告發(fā)現(xiàn)糖尿病人群中胰腺癌的發(fā)病率明顯高于普通人群；也有人注意到慢性胰腺炎病人與胰腺癌的發(fā)病存在一定關(guān)系，慢性胰腺炎病人發(fā)生胰腺癌的比例明顯增高；另外還有許多因素與此病的發(fā)生有一定關(guān)系，如職業(yè)、環(huán)境、地理因素等。

類器官是衍生于干細(xì)胞或前體細(xì)胞的器官特異性細(xì)胞集合。體外培養(yǎng)的類器官在細(xì)胞成分和組織架構(gòu)上與對應(yīng)器官高度相似，并具備相應(yīng)的功能學(xué)特征。與常規(guī)細(xì)胞在二維環(huán)境中培養(yǎng)得到的單一細(xì)胞類群不同，類器官培養(yǎng)是在三維環(huán)境中培養(yǎng)出特定組織器官包含的多種細(xì)胞類群，其培養(yǎng)體系與體內(nèi)微環(huán)境更為相似。因此，各種器官在生理病理的基礎(chǔ)研究、精準(zhǔn)醫(yī)療、藥物篩選和開發(fā)、基因治療、再生醫(yī)學(xué)等方面具有巨大的應(yīng)用前景。

因此，建立胰腺癌類器官模型不但有利于胰腺癌的基礎(chǔ)研究，而且有助于胰腺癌的診斷與治療，提高胰腺癌患者的生存率。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，本發(fā)明的目的是提供一種胰腺癌類器官、培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取以下的技術(shù)方案：

第一方面，本發(fā)明提供一種胰腺癌類器官培養(yǎng)基，包括基礎(chǔ)培養(yǎng)基和特異性添加因子，所述特異性添加因子包括如下終濃度的組分：

B27，0.5-5×；

EGF，5-100ng/ml；

Noggin，20-1000ng/ml；

R-spondin?1，50-1000ng/ml；

Wnt3a，50-500ng/ml；

Igf?2，10-100ng/ml；

SB?505124，0.5-10μM；

SB?203580，0.5-10μM；

Y-33075，1-100nM。

進(jìn)一步的，所述基礎(chǔ)培養(yǎng)基為Advanced?DMEM/F12。

進(jìn)一步的，所述特異性添加因子包括如下終濃度的組分：