[發明專利]一種脫細胞氣管支架的制備方法

在審

• 申請號: 202310424159.5
• 申請日: 2023-04-20
• 公開（公告）號: CN116271239A
• 公開（公告）日: 2023-06-23
• 發明（設計）人: 史宏燦;盧毅;盧丹;孫飛
• 申請（專利權）人: 揚州大學
• 主分類號: A61L27/36
• 分類號: A61L27/36
• 代理公司: 揚州蘇中專利事務所(普通合伙) 32222
• 代理人: 許必元

1.一種脫細胞氣管支架的制備方法，其特征在于，所述制備方法如下：

步驟(1)：原料取新鮮氣管，進行預處理；

步驟(2)：將步驟(1)中處理好的氣管轉移至質量體積比為1％-4％的3-[3-(膽酰胺丙基)二甲氨基]丙磺酸內鹽溶液中在37℃恒溫搖床以60-120rpm轉速孵育1-6h；

步驟(3)：孵育后的氣管用無菌PBS洗滌；

步驟(4)：將洗滌完畢的氣管置于含pH為8.0的Tris-HCl緩沖液，1-5mM?MgSO₄，1-10mMCaCl₂，2000-4000U/L?DNase-I工作溶液中在37℃恒溫搖床以60-120rpm轉速孵育6-12h。

2.根據權利要求1所述的脫細胞氣管支架的制備方法，其特征在于，步驟(1)中，無菌手術操作獲取新西蘭兔氣管為原料，修剪多余筋膜、脂肪組織，之后將氣管浸沒于提前4℃預冷的加入的三抗的磷酸緩沖鹽溶液中漂洗。

3.根據權利要求1所述的脫細胞氣管支架的制備方法，其特征在于，步驟(1)所述原料取新鮮氣管，進行預處理，具體步驟如下：無菌手術操作獲取新鮮氣管為原料，經過手術器械修剪多余的筋膜、脂肪組織后，將氣管浸沒于提前4℃預冷的加入三抗的PBS中漂洗3遍。

4.根據權利要求1所述的脫細胞氣管支架的制備方法，其特征在于，步驟(2)中，將步驟(1)中處理好的氣管轉移至質量體積比為1％-4％的3-[3-(膽酰胺丙基)二甲氨基]丙磺酸內鹽溶液中在37℃恒溫搖床以100rpm轉速孵育3h。

5.根據權利要求1所述的脫細胞氣管支架的制備方法，其特征在于，步驟(3)中，孵育后的氣管用無菌PBS洗滌3次，每次5min。

6.根據權利要求1所述的脫細胞氣管支架的制備方法，其特征在于，步驟(4)將洗滌完畢的氣管置于含pH為8.0的Tris-HCl緩沖液，1.5mM?MgSO₄，2mM?CaCl₂，2000-4000U/LDNase-I工作溶液中在37℃恒溫搖床以60rpm轉速孵育12h。