[發明專利]一種能誘導血漿干細胞分泌細胞因子的方法在審
| 申請號： | 202310411269.8 | 申請日： | 2023-04-18 |
| 公開（公告）號： | CN116463287A | 公開（公告）日： | 2023-07-21 |
| 發明（設計）人： | 徐子恩;弗萊德·范德里希;胡建杰 | 申請（專利權）人： | 貝美緹（上海）健康科技有限公司 |
| 主分類號： | C12N5/0789 | 分類號： | C12N5/0789;C12P21/00 |
| 代理公司： | 北京箐昱專利代理事務所(普通合伙) 16105 | 代理人： | 張鋒 |
| 地址： | 200000 上海*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 誘導 血漿 干細胞 分泌 細胞因子 方法 | ||
1.一種能誘導血漿干細胞分泌細胞因子的方法，其特征在于，包括步驟如下：
步驟一、選取T25培養瓶，加入完全培養基；
步驟二、取傳代培養的血漿干細胞，接種于T25培養瓶中的完全培養基中進行過培養；
步驟三、待細胞濃度融合至75％后，吸出培養瓶中的培養基，用PBS對細胞清洗2次，再向培養瓶中加入誘導培養基，繼續培養30-35小時，所述誘導培養基各組分以培養基終濃度計為：玉米素19-24mg/mL、轉鐵蛋白10-12mg/mL、海藻酸鈉51-54μg/mL、谷氨酰胺0.06-0.1mg/mL、葡萄糖1-10mg/mL、淫羊藿素0.3-0.5mg/mL、胰島素0.20-0.5mg/mL、3-異丁基-1-甲基黃嘌呤0.5-1mmol/L、吲哚美辛0.2-0.8mmol/L；
步驟四、將培養瓶中的細胞及培養基均分轉移入兩個培養瓶中，同時補充誘導培養基進行擴培養，培養35-40小時，收集培養基，獲取細胞因子。
2.根據權利要求1所述的一種能誘導血漿干細胞分泌細胞因子的方法，其特征在于：步驟一中所述完全培養基為DMEM-HG/F12培養基中加入葡甲胺80-85ng/mL、右旋糖苷25-28μg/mL、甘草酸二鉀2-4mg/mL。
3.根據權利要求1所述的一種能誘導血漿干細胞分泌細胞因子的方法，其特征在于：步驟二血漿干細胞的接種密度為1-2×105個/mL，誘導培養過程在37℃，4-5％CO2，4-5％O2的條件下進行。
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