[發明專利]一種用于預防寵物腹瀉的凝結芽孢桿菌King27及菌劑、制備方法和應用

在審

• 申請號: 202310387894.3
• 申請日: 2023-04-12
• 公開（公告）號: CN116463258A
• 公開（公告）日: 2023-07-21
• 發明（設計）人: 周文浩;王麗媛;孫川;蔣能凱;郄璐;張永娟;房鈺;王雪嬌
• 申請（專利權）人: 山東威曼寵物食品有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A61K35/742;A61P31/02;A23K10/18;A23K50/40;A23K50/60;C12R1/07
• 代理公司: 山東舜源聯合知識產權代理有限公司 37359
• 代理人: 于曉曉

本發明涉及微生物應用技術領域，具體涉及一種用于預防寵物腹瀉的凝結芽孢桿菌King27及菌劑、制備方法和應用。凝結芽孢桿菌(Bacillus?coagulans)King27于2022年8月19日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCCNo.25556，保藏地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號。該菌株能夠有效抑制引起寵物腹瀉的常見病原菌。同時經試驗驗證，將凝結芽孢桿菌King27制成的菌劑添加至寵物的飼喂飼料，可以有效預防寵物受涼導致的季節性腹瀉和乳糖不耐受引起的腹瀉，大大降低寵物腹瀉率，對于日常維持寵物健康、預防寵物腹瀉具有重要意義。

技術領域

本發明涉及微生物應用技術領域，具體涉及一種用于預防寵物腹瀉的凝結芽孢桿菌King27及菌劑、制備方法和應用。

背景技術

犬和貓是現在最常見的家庭寵物，但其消化系統非常脆弱和敏感，許多細小因素都會引起腸道內環境的紊亂，導致寵物出現腹瀉、嘔吐等癥狀。日常生活中，引起寵物腹瀉的常見原因包括以下幾種：1、寵物斷奶后換寵物奶粉，乳糖不耐受導致腹瀉；2、環境溫度改變導致的腸胃受涼，出現季節性腹瀉；3、飲食或環境導致細菌侵入腸胃系統，細菌感染導致腹瀉。

目前治療寵物腹瀉以口服抗生素藥物為主，主要治療細菌感染引起的腹瀉，但是抗生素容易造成寵物腸道菌群失調，抗生素在寵物腸道內會造成寵物腸道的菌群失調使病后的寵物很難完全康復。抗菌藥物的使用同樣存在生態安全、藥物殘留、耐藥性、抗生素相關性腹瀉等弊端，近年來，世界各國都在推進飼料“禁抗”模式，因此尋求安全有效的抗生素替代品迫在眉睫。

中國專利CN114437993A公開了一種羅伊氏乳桿菌及其在制備預防貓腹瀉制劑中的應用，對于沙門氏菌、空腸彎曲桿菌和志賀氏菌等常見致貓腹瀉的致病菌有抑菌效果。中國專利CN113057253B涉及一種調理腸胃的復合益生菌寵物食品，通過自制益生菌添加劑，并配合特定的中藥提取物和兒茶素，相互之間協同發生作用，從而可以對寵物腸道中的有益微生物實現增殖，而對腸道中有害菌起到抑制效果，最終改善寵物腸道中微生物種群結構和數量，有效調節了寵物腸胃。市面上已有或者已報道的用于預防、治療寵物腸道疾病的益生菌制劑或復合益生菌制劑，主要針對有害菌侵染引起的寵物腹瀉，功能較為單一，對于寵物日常生活中出現的冷涼瀉、乳糖不耐受性腹瀉有預防效果的益生菌產品未見報道。

發明內容

針對現有用于預防或治療寵物腹瀉的益生菌制劑功能單一、防治效果達不到預期的問題，本發明提供一種用于預防寵物腹瀉的凝結芽孢桿菌King27及其代謝制劑、應用，該菌種不僅可以較強地抑制腸道病原菌，還能夠預防寵物季節性腹瀉和寵物斷奶后換寵物奶粉導致的乳糖不耐受腹瀉。

第一方面，本發明提供一種用于預防寵物腹瀉的凝結芽孢桿菌King27，凝結芽孢桿菌(Bacillus?coagulans)King27于2022年8月19日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCC?No.25556，保藏地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號。

凝結芽孢桿菌是兼性厭氧菌，在有氧及無氧的環境下都可生長，能適應低氧的腸道環境，對酸和膽汁有較高的耐受性，能夠進行乳酸發酵，產生的L-乳酸能降低腸道pH值，抑制有害菌，并能促進雙歧桿菌等有益菌的生長和繁殖。凝結芽孢桿菌能夠形成芽孢，與其他不產乳酸的芽孢桿菌相比，有利于恢復胃腸道的微生態平衡。凝結芽孢桿菌芽孢發酵后產生大量抗菌凝固素，能有效抑制需氧致病菌生長。

第二方面，本發明提供一種用于預防寵物腹瀉的凝結芽孢桿菌King27菌劑，包括上述凝結芽孢桿菌King27的菌體濃縮液。

第三方面，本發明提供上述凝結芽孢桿菌King27菌劑的制備方法，具體包括以下步驟：

(1)取冷凍保存的凝結芽孢桿菌King27菌株進行活化，將活化后的單一菌落接種于MRS液體培養基中，40～45℃、200r/min培養18～24h，獲得種子液；