[發明專利]一種用于預防寵物腹瀉的凝結芽孢桿菌King27及菌劑、制備方法和應用

在審

• 申請號: 202310387894.3
• 申請日: 2023-04-12
• 公開（公告）號: CN116463258A
• 公開（公告）日: 2023-07-21
• 發明（設計）人: 周文浩;王麗媛;孫川;蔣能凱;郄璐;張永娟;房鈺;王雪嬌
• 申請（專利權）人: 山東威曼寵物食品有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A61K35/742;A61P31/02;A23K10/18;A23K50/40;A23K50/60;C12R1/07
• 代理公司: 山東舜源聯合知識產權代理有限公司 37359
• 代理人: 于曉曉

1.一種用于預防寵物腹瀉的凝結芽孢桿菌King27，其特征在于，凝結芽孢桿菌(Bacillus?coagulans)King27于2022年8月19日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCC?No.25556，保藏地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號。

2.一種用于預防寵物腹瀉的凝結芽孢桿菌King27菌劑，其特征在于，包括如權利要求1所述的凝結芽孢桿菌King27的菌體濃縮液。

3.一種如權利要求2所述凝結芽孢桿菌King27菌劑的制備方法，其特征在于，具體包括以下步驟：

(1)取冷凍保存的凝結芽孢桿菌King27菌株進行活化，將活化后的單一菌落接種于MRS液體培養基中，40～45℃、200r/min培養18～24h，獲得種子液；

(2)將種子液接種進入一級發酵培養基，通氣、40～45℃、200r/min搖床培養22～26h后，得到一級發酵液；將一級發酵液移種進入二級發酵培養基，通氣、40～45℃、200r/min搖床培養45～50h后，得到二級發酵液；

(3)將二級發酵液離心后，收集菌體，使用無菌生理鹽水洗滌后，重懸于15％(w/w)的復原脫脂乳中，獲得懸濁液；將菌懸液冷凍干燥后，獲得菌粉；

(4)將菌粉與葡萄糖混合，制成菌劑。

4.如權利要求3所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)中活化的具體操作為：取冷凍保存的凝結芽孢桿菌King27菌株，在MRS平板培養基上進行劃線培養，42℃、有氧培養48h。

5.如權利要求3所述的制備方法，其特征在于，步驟(2)中，種子液接種進入一級發酵培養基的接種量為4％～6％。

6.如權利要求3所述的制備方法，其特征在于，步驟(2)中，一級發酵培養基和二級發酵培養基的制備方法如下：

葡萄糖40g/L、酵母膏10g/L、蛋白胨15g/L、磷酸氫二鉀3g/L、硫酸錳0.05g/L、氯化銨4g/L、碳酸鈣18g/L，培養基于121℃滅菌20min，冷卻至40～45℃備用。

7.一種如權利要求1所述凝結芽孢桿菌King27在制備預防寵物腸道病原菌引起的腹瀉的產品上的應用。

8.一種如權利要求1所述凝結芽孢桿菌King27在制備預防寵物受涼導致的季節性腹瀉的產品上的應用。

9.一種如權利要求1所述凝結芽孢桿菌King27在制備預防寵物乳糖不耐受引起的腹瀉的產品上的應用。