[發明專利]檢測白血病抑制因子的試劑盒及檢測方法

在審

• 申請號: 202310363626.8
• 申請日: 2023-03-31
• 公開（公告）號: CN116298320A
• 公開（公告）日: 2023-06-23
• 發明（設計）人: 曹永彤;孟祥征;周允;趙偉;李可;段卓男
• 申請（專利權）人: 深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司;中日友好醫院（中日友好臨床醫學研究所）
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/53;G01N21/76
• 代理公司: 北京派特恩知識產權代理有限公司 11270
• 代理人: 趙翠萍;王黎延

本公開涉及檢測白血病抑制因子的試劑盒及檢測方法。所述試劑盒包括：第一試劑，所述第一試劑含有包被有第一抗人白血病抑制因子LIF抗體的固定相；第二試劑，所述第二試劑含有具有標記物的第二抗人LIF抗體，其中所述第二抗人LIF抗體不同于所述第一抗人LIF抗體；發光底物液，其中所述發光底物液含有能夠與所述標記物反應產生化學發光的發光底物；和抗干擾劑，所述抗干擾劑含有鼠IgG和吐溫20。該試劑盒能有效消除樣本中的干擾而獲得準確的結果。

技術領域

本公開涉及血液分析領域，特別涉及用于檢測白血病抑制因子的試劑盒以及白血病抑制因子的檢測方法。

背景技術

人類白血病抑制因子(hLIF)是一種具有多種生物活性并對不同細胞類型均有影響的白細胞介素6型細胞因子，是一種具有202個氨基酸的多肽。與其他白細胞介素家族成員類似，白血病抑制因子(LIF)與含有GP130的受體復合物結合，激活類似的信號級聯，如STAT3的磷酸化通路。已有研究證明，LIF的高表達水平和高血清水平在多種癌癥的不良預后判斷中具有一定的輔助作用。在胰腺導管腺癌中LIF是活化胰腺星狀細胞，并激活癌細胞STAT3磷酸化的關鍵旁分泌因子。藥理學上的LIF阻斷和基因上的受體缺失都可以顯著減緩腫瘤的進展，并增強化療有效性。

然而還未見檢測LIF的免疫學測定試劑盒在售。

因此，有必要提供利用免疫學方法準確檢測LIF的試劑盒以及檢測方法。

發明內容

有鑒于此，本公開意在提供一種檢測白血病抑制因子的試劑盒及方法。該試劑盒利用免疫夾心法能夠更準確檢測白血病抑制因子，并且在存在干擾的情況下，特別是存在異嗜性抗體(HA)和/或自身抗體干擾的情況下下，能夠有效抗干擾，而避免假性結果，或者偏高或偏低的不準確結果。

本公開的第一方面提供一種用于檢測人類白血病抑制因子的試劑盒，其中所述試劑盒包括：

第一試劑，所述第一試劑含有包被有第一抗人白血病抑制因子LIF抗體的固定相；

第二試劑，所述第二試劑含有具有標記物的第二抗人LIF抗體，其中所述第二抗人LIF抗體不同于所述第一抗人LIF抗體；

發光底物液，其中所述發光底物液含有能夠與所述標記物反應產生化學發光的發光底物；和

抗干擾劑，所述抗干擾劑含有鼠IgG和吐溫20。

根據一種實施方式，所述第一試劑與所述抗干擾劑以混合形式提供在所述試劑盒中作為混合試劑。

所述混合試劑中，所述鼠IgG的濃度為100～1000μg/mL，且所述吐溫20?的濃度為100～1000μg/mL。優選地，所述混合試劑中，所述鼠IgG的濃度為300～700μg/mL，且所述吐溫20的濃度為300～700μg/mL。

根據一種實施方式，固定相為超順磁性微粒。

根據一種實施方式，所述標記物選自生物素、地高辛、堿性磷酸酶、辣根過氧化物酶和熒光素。優選所述標記物為堿性磷酸酶。

根據一種較優的實施方式，所述標記物為堿性磷酸酶，且所述發光底物為AMPPD。

本公開的第二方面提供一種檢測人類白血病抑制因子LIF的方法，包括：

將一定量的第一試劑、抗干擾劑、第二試劑混合和樣本混合均勻得到第一反應液，并孵育3～10分鐘；

分離出固定相；

向所述固定相中加入一定量發光底物液混合均勻得到第二反應液，并孵育10～20分鐘；

檢測所述第二反應液中產生的光子數，其中所測得的光子數與所述樣本中LIF的含量成正比。