[發明專利]一年生辣椒不同果實發育時期的內參基因及其引物和應用在審
| 申請號： | 202310352934.0 | 申請日： | 2023-04-04 |
| 公開（公告）號： | CN116656854A | 公開（公告）日： | 2023-08-29 |
| 發明（設計）人： | 衡周;謝炳春;徐小萬;李穎;王恒明;徐曉美;李濤 | 申請（專利權）人： | 廣東省農業科學院蔬菜研究所 |
| 主分類號： | C12Q1/6895 | 分類號： | C12Q1/6895;C12Q1/6851;C12N15/11 |
| 代理公司： | 廣州專理知識產權代理事務所(普通合伙) 44493 | 代理人： | 張鳳 |
| 地址： | 510640 廣東省*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一年生 辣椒 不同 果實 發育 時期 內參 基因 及其 引物 應用 | ||
1.一年生辣椒不同果實發育時期的內參基因，其特征在于，所述內參基因為CT8，其核酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。
2.權利要求1所述的內參基因CT8在制備一年生辣椒不同果實發育時期檢測試劑盒的應用。
3.權利要求1所述一年生辣椒不同果實發育時期的內參基因的特異性引物，其特征在于，所述內參基因CT8基因的特異性引物如SEQ?ID?NO.30和SEQ?ID?NO.31所示。
4.權利要求3所述的特異性引物在制備一年生辣椒不同果實發育時期檢測試劑盒的應用。
5.一年生辣椒不同果實發育時期的內參基因的篩選方法，其特征在于，包括如下步驟：
1)果實預處理：獲取不同生長發育時期的一年生辣椒果實，研磨成粉末；
2)提取RNA：提取不同生長發育時期的辣椒果實粉末的RNA；
3)合成cDNA第一鏈；
4)篩選候選內參基因，設計引物；
所述候選內參基因包括GAPDH、UBI-3、UBI-1、ACT、EIF、β-TUB、α-TUB、CT1、CT2、CT3、CT4、CT5、CT6、CT7、CT8、CT9、CT10、CT11和CT12；
5)PCR擴增cDNA；
6)PCR擴增候選內參基因，使用軟件計算引物擴增效率和斜率R2；
7)篩選內參基因：使用NormFinder、ΔCt、BestKeeper和geNorm四個軟件分析候選內參基因穩定性，根據所獲得的結果進行綜合排序和評價，篩選出權利要求1所述的一年生辣椒果實發育的最適內參基因CT8。
6.根據權利要求5所述的一年生辣椒不同果實發育時期的內參基因的篩選方法，其特征在于，步驟4)所述候選內參基因的引物序列如SEQ?ID?NO.2～SEQ?ID?NO.39所示。
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