[發明專利]一種低糖基化的葡萄糖基甜菊糖苷的制備方法

在審

• 申請號: 202310290776.0
• 申請日: 2023-03-23
• 公開（公告）號: CN116144722A
• 公開（公告）日: 2023-05-23
• 發明（設計）人: 朱理平;郭曉杰;何冬生;程雙武;宋維才
• 申請（專利權）人: 東臺市浩瑞生物科技有限公司
• 主分類號: C12P19/56
• 分類號: C12P19/56;C12P19/18;C12P19/14;C07H15/24;C07H1/06
• 代理公司: 濰坊正信致遠知識產權代理有限公司 37255
• 代理人: 王偉霞

本發明涉及甜味劑生產技術領域，尤其涉及一種低糖基化的葡萄糖基甜菊糖苷的制備方法，包括以下步驟：(1)取甜菊糖苷和β?環糊精，加入純化水溶解、控溫和pH，加入葡萄糖基轉移酶，反應后升溫，得到的反應產物料液備；(2)取反應產物料液，降溫后加入葡萄糖基淀粉酶，保溫反應一段時間后，升溫，得到的反應產物料液備用；(3)取反應產物料液進入樹脂柱中，采用純化水和乙醇沖洗樹脂柱，收集的解吸液備用；(4)取解吸液，濃縮至固含物含量為40wt％?60wt％時，噴霧干燥得到低糖基化的葡萄糖基甜菊糖苷產品。利用該制備方法可以提高低糖基化的葡萄糖基甜菊糖苷的產率。

技術領域

本發明涉及甜味劑生產技術領域，尤其涉及一種低糖基化的葡萄糖基甜菊糖苷的制備方法。

背景技術

甜菊糖苷是甜葉菊提取物中約40種糖苷分子的總稱，均由具有甜味的親水性糖基與疏水性的甜菊醇苷元組成。其中Rebaudioside?D和Rebaudioside?M的味質口感較好，萊鮑迪苷A(Rebaudioside?A，RA)口感較好但甜味略嫌持久，而斯替夫苷(Stevioside，St)、萊鮑迪苷C和其它低分子量甜菊糖苷則帶有一定的輕微苦味或甘草余味，這種微苦余味降低了它作為天然甜味劑的品質。除了具有苦味的雜質對甜菊糖苷產品口感味質有影響外，甜菊糖苷自身的甜菊醇苷元分子結構也是產生苦澀余味和后甜(即甜味持久)的因素。而從味覺角度的生物學來看，不同甜菊糖苷與甜味受體和苦味受體的結合能差異是一個重要因素。目前為了改善甜菊糖苷的口感，通過酶法糖基化引入糖基進而得到口感適宜的甜味劑，但是現有的制備方法，反應不易控制，并且制備的低糖基化的葡萄糖基甜菊糖苷產率較低。因此針對上述問題，探索研究出一種低糖基化的葡萄糖基甜菊糖苷的制備方法。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是：針對現有技術存在的不足，提供一種低糖基化的葡萄糖基甜菊糖苷的制備方法，利用該制備方法可以提高低糖基化的葡萄糖基甜菊糖苷的產率。

為解決上述技術問題，本發明的技術方案是：

一種低糖基化的葡萄糖基甜菊糖苷的制備方法，所述制備方法包括以下步驟：

(1)將原料甜菊糖苷和β-環糊精按照質量比1:1-5的比例混合，加入純化水攪拌溶解、控制反應溫度和pH，加入葡萄糖基轉移酶，保溫反應一段時間后升溫，得到的反應產物料液備用；

(2)取步驟(1)的反應產物料液，降溫后加入葡萄糖基淀粉酶，保溫反應一段時間后，升溫，得到的反應產物料液備用；

(3)取步驟(2)中備用的反應產物料液，正流進入樹脂柱中，先采用純化水沖洗大孔樹脂柱，然后再采用10％-30％v/v的乙醇沖洗樹脂柱，最后采用60％-80％v/v的乙醇沖洗樹脂柱，收集的解吸液備用；

(4)取步驟(3)中的解吸液，濃縮至固含物含量為40wt％-60wt％時，噴霧干燥得到低糖基化的葡萄糖基甜菊糖苷產品。

作為一種改進的技術方案，步驟(1)中所述純化水與所述甜菊糖苷按照質量比3-5:1的比例加入。

作為一種改進的技術方案，步驟(1)中控制反應溫度為50-60℃，控制pH為5.5-6.2。

作為一種改進的技術方案，步驟(1)中的反應時間為12-24h，升溫至95-100℃。

作為一種改進的技術方案，步驟(1)中葡萄糖基轉移酶按照每100g甜菊糖苷中1ml-5ml的用量加入，所述葡萄糖基轉移酶的活力為100U/g。

作為一種改進的技術方案，步驟(2)中所述葡萄糖基淀粉酶按照每100g甜菊糖苷中0.1ml-0.5ml的用量加入，且所述葡萄糖基淀粉酶的活力為100000u/ml。

作為一種改進的技術方案，步驟(2)中反應產物料液降溫至40-60℃，保溫反應的時間為24-48h，升溫至95-100℃。