[發(fā)明專利]一種低糖基化的葡萄糖基甜菊糖苷的制備方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202310290776.0
• 申請日: 2023-03-23
• 公開（公告）號: CN116144722A
• 公開（公告）日: 2023-05-23
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 朱理平;郭曉杰;何冬生;程雙武;宋維才
• 申請（專利權(quán)）人: 東臺市浩瑞生物科技有限公司
• 主分類號: C12P19/56
• 分類號: C12P19/56;C12P19/18;C12P19/14;C07H15/24;C07H1/06
• 代理公司: 濰坊正信致遠知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37255
• 代理人: 王偉霞

1.一種低糖基化的葡萄糖基甜菊糖苷的制備方法，其特征在于所述制備方法包括以下步驟：

(1)將原料甜菊糖苷和β-環(huán)糊精按照質(zhì)量比1:1-5的比例混合，加入純化水攪拌溶解、控制反應(yīng)溫度和pH，加入葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶，保溫反應(yīng)一段時間后升溫，得到的反應(yīng)產(chǎn)物料液備用；

(2)取步驟(1)的反應(yīng)產(chǎn)物料液，降溫后加入葡萄糖基淀粉酶，保溫反應(yīng)一段時間后，升溫，得到的反應(yīng)產(chǎn)物料液備用；

(3)取步驟(2)中備用的反應(yīng)產(chǎn)物料液，正流進入樹脂柱中，先采用純化水沖洗大孔樹脂柱，然后再采用10％-30％v/v的乙醇沖洗樹脂柱，最后采用60％-80％v/v的乙醇沖洗樹脂柱，收集的解吸液備用；

(4)取步驟(3)中的解吸液，濃縮至固含物含量為40wt％-60wt％時，噴霧干燥得到低糖基化的葡萄糖基甜菊糖苷產(chǎn)品。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種低糖基化的葡萄糖基甜菊糖苷的制備方法，其特征在于：步驟(1)中所述純化水與所述甜菊糖苷按照質(zhì)量比3-5:1的比例加入。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種低糖基化的葡萄糖基甜菊糖苷的制備方法，其特征在于：步驟(1)中控制反應(yīng)溫度為50-60℃，控制pH為5.5-6.2。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種低糖基化的葡萄糖基甜菊糖苷的制備方法，其特征在于：步驟(1)中的反應(yīng)時間為12-24h，升溫至95-100℃。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種低糖基化的葡萄糖基甜菊糖苷的制備方法，其特征在于：步驟(1)中葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶按照每100g甜菊糖苷中1ml-5ml的用量加入，所述葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶的活力為100U/g。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種低糖基化的葡萄糖基甜菊糖苷的制備方法，其特征在于：步驟(2)中所述葡萄糖基淀粉酶按照每100g甜菊糖苷中0.1ml-0.5ml的用量加入，且所述葡萄糖基淀粉酶的活力為100000u/ml。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種低糖基化的葡萄糖基甜菊糖苷的制備方法，其特征在于：步驟(2)中反應(yīng)產(chǎn)物料液降溫至40-60℃，保溫反應(yīng)的時間為24-48h，升溫至95-100℃。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種低糖基化的葡萄糖基甜菊糖苷的制備方法，其特征在于：步驟(3)中樹脂柱內(nèi)填充的樹脂為大孔吸附樹脂，所述反應(yīng)物料液按照0.5/h-1.5BV/h的流速正流進入樹脂柱中；所述純化水按照1BV/h-3BV/h的流速、樹脂柱體積1-2BV的量沖洗樹脂柱。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種低糖基化的葡萄糖基甜菊糖苷的制備方法，其特征在于：步驟(3)中10％-30％v/v的乙醇按照1BV-3BV/h的流速正流沖洗樹脂柱；60％-80％v/v的乙醇按照1BV/h-3BV/h的流速正流沖洗樹脂柱。