[發明專利]一種梣酮-血藍蛋白免疫原及其多克隆抗體與制備方法、應用

在審

• 申請號: 202310277928.3
• 申請日: 2023-03-21
• 公開（公告）號: CN116425861A
• 公開（公告）日: 2023-07-14
• 發明（設計）人: 潘潔;鄭江;李維維;胡紫霞;伍楚天
• 申請（專利權）人: 貴州醫科大學
• 主分類號: C07K14/795
• 分類號: C07K14/795;C07K1/107;C07K16/16;G01N33/53;G01N33/68
• 代理公司: 貴州派騰知識產權代理有限公司 52114
• 代理人: 龍遠寧

1.一種梣酮-血藍蛋白免疫原，其特征在于，是選擇高免疫原性的血藍蛋白作為載體蛋白，與梣酮化學合成得到。

2.根據權利要求1所述的免疫原，其特征在于，所述梣酮-血藍蛋白免疫原，是通過如下方法制備得到：取梣酮，加入丙酮，充分溶解后，再加入DMDO，室溫攪拌反應，37℃下N₂流吹干，殘渣加入Native?KLH溶液，常溫攪拌反應1，即得免疫原FRA-KLH。

3.根據權利要求2所述的免疫原，其特征在于，所述步驟具體如下：精密稱取梣酮7.3mg，加入丙酮750μL，充分溶解后，再加入DMDO1.5mL，室溫攪拌反應30min，37℃下N₂流吹干，殘渣加入NativeKLH溶液1.48mL，常溫攪拌反應1h，即得免疫原FRA-KLH。

4.一種選擇性識別梣酮-蛋白共價結合物的多克隆抗體，其特征在于，采用權利要求1中所述的免疫原免疫動物后制備得到。

5.根據權利要求4所述的抗體，其特征在于，所述免疫動物后制備得到，是對家兔進行免疫接種后分離血清得到。

6.根據權利要求4所述的抗體，其特征在于，所述抗體，是通過如下方法制備得到：對家兔進行免疫接種，家兔經背部隨機10處注射1.0mL的免疫原乳劑，第一次免疫接種FCA-FRA-KLH，間隔7天，用FIA-FRA-KLH進行加強免疫，定時分離血清。

7.根據權利要求4所述的抗體，其特征在于，所述FCA-FRA-KLH，是采用弗氏完全佐劑的免疫原乳劑。

8.根據權利要求4所述的抗體，其特征在于，所述FIA-FRA-KLH是采用弗氏不完全佐劑的免疫原乳劑。

9.權利要求4所述抗體在特異性識別梣酮-蛋白加合物中的應用。

10.根據權利要求9所述的應用，其特征在于，所述特異性識別梣酮-蛋白加合物中的應用，是對梣酮誘發肝損傷的蛋白靶點進行ELISA、Westernblot和免疫熒光檢測方面的應用。