[發明專利]一種用于食管鱗癌或癌前病變檢測的試劑、試劑盒及應用

在審

• 申請號: 202310273877.7
• 申請日: 2023-03-20
• 公開（公告）號: CN116356027A
• 公開（公告）日: 2023-06-30
• 發明（設計）人: 周俊;董蘭蘭;張良祿;熊楊輝;鄭義慧
• 申請（專利權）人: 武漢艾米森生命科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12N15/11
• 代理公司: 武漢華之喻知識產權代理有限公司 42267
• 代理人: 曹葆青;方放

本發明屬于生物醫藥技術領域，更具體地，涉及一種用于食管鱗癌或癌前病變檢測的試劑、試劑盒及應用。本發明提供的試劑和試劑盒通過檢測樣本中生物標志物的甲基化水平，不僅可以有效區分食管鱗癌患者和健康人，還顯著提高了食管鱗癌癌前病變的檢測靈敏度和檢出率，適用于食管鱗癌或癌前病變的早篩早診。

技術領域

本發明屬于生物醫藥技術領域，更具體地，涉及一種用于食管鱗癌或癌前病變檢測的試劑、試劑盒及應用。

背景技術

食管癌是全球第八大常見癌癥類型，死亡率在所有癌癥類型中排第六位。與其他癌癥相比，食管鱗癌/食管癌的預后相對較差，大多數研究顯示食管癌患者的5年生存率在15％～25％之間。由于缺乏有效的早期診斷方法，大部分食管鱗癌患者確診時就已處于疾病晚期，甚至超過一半的患者在疾病確診時就已發生遠處轉移，首次診斷時有遠處器官轉移的食管癌患者的生存率特別差，一項回顧性研究表明，這些患者的中位生存期僅為6個月，1年或2年生存率分別為21.1％或11.8％。在亞洲人群中，食管鱗癌的發病率遠高于食管腺癌，所以食管鱗癌的早診早治十分必要。

食管鱗癌患者通常表現為吞咽困難和體重減輕，出現相應癥狀時通常處于疾病晚期，預后不良，所以針對食管鱗癌的早診早治是非常必要的。目前常規檢查中的一些異常可能提示食管鱗癌的存在，但診斷的金標準仍然是內鏡檢查及活檢。在臨床中，通過內鏡直接顯示腫塊幾乎可以確定腫瘤的可能性，但必須對病變進行活檢。同時，內鏡檢測依賴于醫院硬件設備和醫生經驗，并且具有侵入性、患者依從性低等缺點。除了傳統的內鏡檢查，人們還發明了多種技術來加強對食管癌變的檢測，如進行腫瘤相關標志物(鱗狀細胞癌抗原)檢查、食管吞鋇X線檢查等，但是其檢測的準確性有待商榷。這些現存檢查方式存在的種種不足導致食管鱗癌無法實現大規模的早診早治。

食管鱗癌發生前通常會經歷鱗狀上皮不典型增生直至高級別病變的階段，這一階段為食管鱗癌的癌前病變，提高食管鱗癌癌前病變的檢測靈敏度和特異性對食管鱗癌早診早治具有重要意義。現有技術僅公開了一些能夠用于檢測食管鱗癌的生物標志物，而能夠用于檢測食管鱗癌癌前病變的生物標志物較少，且這些生物標志物診斷食管癌癌前病變的檢測靈敏度和特異性偏低。

發明內容

針對現有技術的缺陷，本發明的目的在于提供了一種用于食管鱗癌或癌前病變檢測的試劑、試劑盒及應用，以改善現有技術食管鱗癌分子診斷手段不足，現有分子診斷標記物對食管鱗癌癌前病變的檢出率低、檢測的靈敏度欠佳等的技術問題，尤其適用于食管鱗癌癌前病變的高靈敏度檢測。

為實現上述目的，本發明提供了一種用于食管鱗癌或癌前病變檢測的試劑，所述試劑包括檢測樣本中生物標志物的甲基化水平的試劑，其中，所述生物標志物選自如下至少一種區域的全長或部分區域：區域Ⅰ、區域Ⅱ、區域Ⅲ、區域Ⅳ、區域Ⅴ和區域Ⅵ；

以GRCh38.p14為參考基因組，所述區域Ⅰ選自Chr5:95619903-95620271，所述區域Ⅱ選自Chr12:54053825-54054021，所述區域Ⅲ選自Chr1:78046506-78046700，所述區域Ⅳ選自Chr7:15686124-15686309，所述區域Ⅴ選自Chr19:57527728-57527905，所述區域Ⅵ選自Chr7:122305450-122310489。

優選地，所述生物標志物選自如SEQ?ID?NO.1-10所示核苷酸序列的一者或至少兩者的組合。

進一步優選地，所述生物標志物選自如下任一組合：

(a)SEQ?ID?NO.3-5中任一者與SEQ?ID?NO.1的組合；

(b)SEQ?ID?NO.5、SEQ?ID?NO.9或SEQ?ID?NO.10與SEQ?ID?NO.2的組合；

(c)SEQ?ID?NO.4、SEQ?ID?NO.7或SEQ?ID?NO.8與SEQ?ID?NO.3的組合；